جلد ۴۲، شماره ۲ - ( ۴-۱۳۹۷ )
جلد ۴۲ شماره ۲ صفحات ۷۸-۷۱ |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Khabiri A, Bayat M B, Hemati B. Production of IgY antibody against Vibrio cholerae cytotoxin B and development of an ELISA for detection of cholera toxin. Research in Medicine 2018; 42 (2) :71-78
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-1838-fa.html
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-1838-fa.html
خبیری علیرضا، بیات مهدیه، همتی بهزاد. تولید آنتی‌بادی مرغی ضد زیر واحد B توکسین ویبریو کلرا و راه‌اندازی روش الایزا جهت تشخیص سم ویبریو کلرا. پژوهش در پزشکی. ۱۳۹۷; ۴۲ (۲) :۷۱-۷۸
انیستیتو پاستور ، akhabiri597@yahoo.com
چکیده: (۴۰۶۹ مشاهده)
خلاصه
سابقه و هدف: با توجه به اهمیت تشخیص سریع سم ویبریو کلرا در نمونه‌هایی مانند آب و یا غذا، در این مطالعه اقدام به طراحی و راه‌اندازی یک روش ایمنواسی برای شناسایی مستقیم سیتوتوکسین B این باکتری، با استفاده از آنتی‌بادی مرغی شده است.
مواد و روش ها: توالی ژنی ctxB در وکتور بیانی pET28a کلون شده و سپس در باکتری BL21 (DE3) بیان گردید. پروتئین‌های نوترکیب حاصله پس از تخلیص با روش ایمنوکروماتوگرافی، به‌صورت درون ماهیچه‌ای به مرغ تزریق و آنتی‌بادی پلی‌کلونال ضد پروتئین CtxB با استفاده از پلی‌اتیلن گلیکول از زرده تخم‌مرغ تخلیص شدند. این آنتی‌بادی‌ها برای طراحی یک روش الایزای ساندویچ مورد استفاده قرار گرفتند. حساسیت آنالیتیک روش طراحی‌شده با استفاده از رقت‌های سریالی پروتئین CtxB نوترکیب مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها: در ازاء هر لیتر کشت باکتری BL21 (DE3) حاوی پلاسمید دربرگیرنده ژن ctxB، 38 میلی‌گرم پروتئین نوترکیب با خلوص بیش از 95 درصد تولید گردید. تیتر آنتی‌بادی ضد CtxB در خون مرغ ایمیونیزه برابر با 1 به 32.000 بود و میزان 9/50 میلی‌گرم آنتی‌بادی مرغی از هر تخم‌مرغ خالص گردید. روش الایزای طراحی‌شده با این آنتی‌بادی امکان تشخیص CtxB را تا غلظت 33 پیکوگرم بر میلی‌لیتر فراهم نمود.
نتیجه گیری و پیشنهادات: آنتی‌بادی‌های مرغی ضد CtxB تولیدشده در این مطالعه، امکان ایجاد یک روش ایمنواسی را فراهم نمودند که با آن تشخیص سریع و با حساسیت بالای سیتوتوکسین B فراهم می‌گردد. لازم است تا در آینده کارآیی این روش جهت تشخیص سم ویبریو در نمونه‌های محیطی مانند آب و یا مواد غذایی مورد بررسی قرار گیرد.
سابقه و هدف: با توجه به اهمیت تشخیص سریع سم ویبریو کلرا در نمونه‌هایی مانند آب و یا غذا، در این مطالعه اقدام به طراحی و راه‌اندازی یک روش ایمنواسی برای شناسایی مستقیم سیتوتوکسین B این باکتری، با استفاده از آنتی‌بادی مرغی شده است.
مواد و روش ها: توالی ژنی ctxB در وکتور بیانی pET28a کلون شده و سپس در باکتری BL21 (DE3) بیان گردید. پروتئین‌های نوترکیب حاصله پس از تخلیص با روش ایمنوکروماتوگرافی، به‌صورت درون ماهیچه‌ای به مرغ تزریق و آنتی‌بادی پلی‌کلونال ضد پروتئین CtxB با استفاده از پلی‌اتیلن گلیکول از زرده تخم‌مرغ تخلیص شدند. این آنتی‌بادی‌ها برای طراحی یک روش الایزای ساندویچ مورد استفاده قرار گرفتند. حساسیت آنالیتیک روش طراحی‌شده با استفاده از رقت‌های سریالی پروتئین CtxB نوترکیب مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها: در ازاء هر لیتر کشت باکتری BL21 (DE3) حاوی پلاسمید دربرگیرنده ژن ctxB، 38 میلی‌گرم پروتئین نوترکیب با خلوص بیش از 95 درصد تولید گردید. تیتر آنتی‌بادی ضد CtxB در خون مرغ ایمیونیزه برابر با 1 به 32.000 بود و میزان 9/50 میلی‌گرم آنتی‌بادی مرغی از هر تخم‌مرغ خالص گردید. روش الایزای طراحی‌شده با این آنتی‌بادی امکان تشخیص CtxB را تا غلظت 33 پیکوگرم بر میلی‌لیتر فراهم نمود.
نتیجه گیری و پیشنهادات: آنتی‌بادی‌های مرغی ضد CtxB تولیدشده در این مطالعه، امکان ایجاد یک روش ایمنواسی را فراهم نمودند که با آن تشخیص سریع و با حساسیت بالای سیتوتوکسین B فراهم می‌گردد. لازم است تا در آینده کارآیی این روش جهت تشخیص سم ویبریو در نمونه‌های محیطی مانند آب و یا مواد غذایی مورد بررسی قرار گیرد.
نوع مطالعه: پژوهشی |
دریافت: 1396/10/2 | پذیرش: 1396/10/23 | انتشار: 1397/4/23
دریافت: 1396/10/2 | پذیرش: 1396/10/23 | انتشار: 1397/4/23
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
This Journal is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License | Research in Medicine
Designed & Developed by : Yektaweb