fa بررسی تاثیر دود سوخت عنبرنسارا بر تغییرات بیان ژن های P53 و CYP2E1 در سلول های سرطان کبد انسان ژنتیک Genetic پژوهشی Original <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">سابقه و هدف</span></span></strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">: سرطان همچنان مهم‌ترین علت مرگ بعد از بیماری‌های قلب و عروق و سوانح است. امروزه تلاش محققین برای بهره‌گیری از درمان‌هایی با حداقل عوارض جانبی و استفاده از طب سنتی و داروهای گیاهی بیشتر شده است. </span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">عنبرنسارا ماده‌ای به ظاهر بی‌ارزش جای خود را در طب سنتی پیدا کرده و در درمان بسیاری از بیماری‌ها کاربرد دارد</span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">. </span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">این مطالعه باهدف ارزیابی اثرات ضد سرطانی دود حاصل از سوختن عنبرنسارا، روی سلول‌های سرطانی کبد و بررسی تغییرات بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P53</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">CYP2E1</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> انجام شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">: در این مطالعه تجربی ابتدا عنبرنسارا از منطقه درگز، در فصل بهار، جمع‌آوری و سپس دود حاصل از سوخت آن در پروپیلن‌گلیکول سرد جمع‌آوری گردید. مقدار دود در حلال محاسبه گردید. رده سلولی سرطان کبد (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">HEPG2</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">) و رده سلولی نرمال کشت گردید. تست سمیت سلولی و مطالعات مرفولوژی انجام و مقدار </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">IC50</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> محاسبه شد. جهت بررسی میزان بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P53</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">CYP2E1</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">، استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">RNA</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">، سنتز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">cDNA</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real Time PCR</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> انجام شد. نتایج توسط آزمون‌های آماری </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">t-test</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">ANOVA</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سطح معناداری (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<0.05</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">) آنالیز گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته‌ها</span></span></strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">: نتایج بررسی‌های مرفولوژیکی و تست سمیت بیانگر آن است که دود حاصل از سوخت عنبرنسارا در غلظت 5/58 میلی‌گرم در میلی‌لیتر سبب افزایش مرگ و میر سلول‌های سرطانی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(IC50=48.79)</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> در مقایسه با گروه شاهد می‌گردد (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<0.05</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">). در بررسی بیان ژن درحالیکه غلظت 117 میلی‌گرم باعث افزایش بیان ژن‌ </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">CYP2E1</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> شد، ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P53</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> در غلظت 5/58 افزایش نشان داد(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<0.05</span></span></span><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">). </span></span><br> <strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه گیری:</span></span></strong><span style="font-family:Tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;"> به نظر می‌رسد دود حاصل از سوختن عنبرنسارا دارای اثر کشندگی بر سلول‌های سرطانی کبد می‌باشد. مدت زمان و غلظت در این اثربخشی موثر است.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background & Aim: </strong>Cancer is the leading cause of death after cardiovascular diseases, and accidents. Nowadays, researchers are increasing their efforts to use treatments with minimal side effects and make an attempt to use traditional medicine and herbal remedies. AnbarNesara is a seemingly worthless substance found in traditional medicine used in the treatment of many diseases. The aim of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of the smoke from the burning of AnbarNesara on liver cancer cells and to investigate the genes expression changes of P53 and CYP2E1.<br> <strong>Materials and Methods</strong>: In the current experimental study, first Anbarnsara was collected from Dargaz region in spring and then the smoke from its fuel was collected in cold propyleneglycol. The amount of smoke in the solvent was calculated. Then, liver cancer cell line (HEPG2) and normal cell line were cultured. Cytotoxicity tests and morphological studies were performed and IC50 value was calculated. RNA extraction, cDNA synthesis, and Real Time PCR were performed to evaluate the expression of P53 and CYP2E1 genes. The results were analyzed using t-test and ANOVA at a significance level of P <0.05.<br> <strong>Results: </strong>The results of morphological studies and toxicity test indicated that smoke from AnbarNesara fuel at a concentration of 58.5 mg/ml increases cancer cell mortality (IC50=48.79) compared to that in the control group (P <0.05). In the study of gene expression, while the concentration of 117 mg increased the expression of CYP2E1 gene, the P53 gene increased at the concentration of 58.5 (P <0.05).<br> <strong>Conclusion: </strong>The smoke from burning Anbarnsara seems to have a lethal effect on liver cancer cells. Duration and concentration are significant in this effectiveness.<br> &nbsp;<br> &nbsp;</div> رده سلولی HepG2, عنبرنسارا, ژن P53, ژن CYP2E1 . HepG2 Cell Line, AnbarNesara, P53 gene, CYP2E1 gene 62 66 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3976-1&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Keikha-Akher مریم کیخاآخر 100319475328460025450 100319475328460025450 No Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، مشهد، ایران Khadije Shahrokhabadi خدیجه شاهرخ آبادی shahrokhabady@yahoo.com 100319475328460025451 100319475328460025451 Yes Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، مشهد، ایران Javad Baharara جواد بهارآرا 100319475328460025452 100319475328460025452 No Research Center for Animal Development Applied Biology & Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، ایران