Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

other اثر مایع فولیکولر انسان بر رشد و تکامل جنینهای اولیه موش در محیط آزمایشگاه The Effect of Human Follicular Fluid (FF) on Preimplantation Mouse Embryo Development in Vitro بین رشته ای ( مدیریت آموزشی، تحقیقات آموزشی، آموزش پزشکی ) Interdisciplinary (Educational Management, Educational research, Statistics, Medical education پژوهشی Original <div style="text-align: justify;">از آنجا که در جریان مکش (آسپیراسیون) اووسیت و گرفتن آن برای لقاح خارج رحمی (in vitro fertilization) همواره مقداری مایع فولیکولر (FF) محبوس در بین سلولهای کومولوس اطراف اووسیت با آن همراه می شود، بر آن شدیم که تاثیر این مایع را بر کلیواژ و رشد و تکامل جنینهای موش در محیط آزمایشگاه مورد بررسی قرار دهیم. بدین منظور طی ۷۲ ساعت کشت جنینهای دو سلولی موش در محیطهای زیر انجام شد و رشد و تکامل آنها تا مرحله بلاستوسیت و هچینگ (پاره شدن زونا) مورد مطالعه قرار گرفت : مدیوم  +Ham , S F۱۰  ۱۰٪ سرم آلبومینارانسان(گروه شاهد)؛ مایع فولیکولر خالص حرارت دیدهHeat treatmented pure) FF= HF۱۰۰)؛ مدیوم هامز مخلوط شده با ۱۰، ۲۵ و ۵۰ درصد مایع فولیکولر حرارت دیده (HF۵۰,HF۲۵,HF۱۰) مایع فولیکولر خالص حرارت ندیده (Untreated or fresh FF= HF۱۰۰) و هامز مخلوط شده با ۱۰ درصد مایع فولیکولر حرارت ندیده (NF۱۰). در ساعت چهل و هشتم کشت آزمایشگاهی، ۵۸/۶ درصد از جنینهای دو یاخته ای در HF۱۰۰ به مرحله بلاستوسیست رسیدند. این نسبت برای HF۱۰ ، HF۲۵ ، HF۵۰ و هامز + سرم به ترتیب ۴۸/۰، ۳۷/۶، ۴۰/۳ و۲۸/۶ درصد بود که درصد بلاستوسیستهای HF۱۰۰ و HF۵۰ به طور معنی داری از هامز+ سرم بیشتر بود (۰/۰۵>(P. ۲۴ ساعت بعد یعنی در ساعت ۷۲ کشت آزمایشگاهی، درصد بلاستوسیست در HF۱۰ ، HF۲۵ , HF۵۰ , HF۱۰۰ و هامز+ سرم به ترتیب ۸۶/۱ ،۷۷/۲،۷۵/۰ ، ۷۰/۳، ۷۱/۶ بود که در مقایسه، فقط اختلاف موجود بین درصد بلاستوسیست در HF۱۰۰ با سایر محیطهای مورد آزمایش از جمله هامز + سرم معنی دار بود( ۰/۰۵>P). در مقابل، تقریبا تمام جنینهایی که در NF۱۰۰ کشت داده شده بودند پس از ۲۴ ساعت از بین رفتند. و از جنینهای کشت داده شده در NF۱۰ حدود ۴۴/۱ درصد در ساعت ۷۲ بلاستوسیست رسیدند که به طور معنی داری کمتر از درصد آن در هامز + سرم و نیز سایر محیطهای مورد تجربه بود(۰/۰۵>P). این نتایج نشان میدهند که مایع فولیکولر انسان به صورت تازه بر رشد و تکامل جنینهای اولیه اثر نامطلوبی دارد اما اگر به روش متداول در آزمایشگاههای IVF حرارت داده شود، (Treatment heat) نه تنها می تواند امکان رشد و تکامل جنینهای اولیه را تا مرحله بلاستوسیست و هجینگ فراها که دارای اثرات امبریوتروفیک نیز می باشد.</div>   SUMMARY Since at oocyte retrieval for in vitro fertilization there is some FF become incorporate to egg, we decided to investigate the effect of this fluid on preimplantation embryo development in vitro. FF was obtained at the time of oocyte retrieval for IVF, centrifuged and then either inactivated by heat and stored at 4°c or without inactivation stored at-20°c until used. Late 2-cell embryos were collected from superovulated 8-weeks-old random-bred Swiss mice 48 after injection of hCG. Rates of development were compared between embryos cultured in Ham's F1O supplemented with 10% human albuminar serum (control group), heat-inactivated pure FF(HF1OO), Ham's FIO supplemented with 50%, 25% and 10% heat-inactivated FF(HF50, HF25, HF1O), non heatinactivated pure FF(NF1OO) and Ham's PIO supplemented with 10% non heat-inactivated FF(NF1O). Between 150 to 500 embryos wert" cultured in each of these media. The percentages of embryos which reached blastocyst in HF1OO, HF50, HF25, HF1O and Ham's at 48h of culture were 58.6, 48.0, 37.6, 40.3 and 28.6 respectively which those in HF1OO and HF50 were significantly greater than those the others (P<0.05). After 72h of culture, these percentages were 86.1, 77.2, 75.0, 70.3 and 71 .6 respectively. In comparison only blastocystreached embryos in HF1OO was significantly greater than those in the rest (P<0.05). In contrast to HFs, almost all embryos which cultured in NF1OO degenerated and from those cultured in NF1O only 44.1 % reached blastocyst at 72hr of culture which was significantly lower than those in the other experimental groups (P<0.05). These results suggest that human heat-inactivated FF could support the mouse embryo development in vitro and accecerates and improves their growth in comparison with Ham's F1O+ serum while non beat-inactivated fluid retards embryo development. 61 69 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3655-123&slc_lang=other&sid=1 Abas ali Karirmpour عباسعلی کریمپور 100319475328460018440 100319475328460018440 Yes فوق لیسانس بافت شناسی و رزیدنت ph.D جنین شناسی دانشگاه تربیت مدرس تهران،تهران،ایران. Ahmad Hosseini احمد حسینی 100319475328460018441 100319475328460018441 No عضو هیئت علمی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی،تهران،ایران. Mojtaba Rezazadeh مجتبی رضازاده 100319475328460018442 100319475328460018442 No عضو هیئت علمی دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس،تهران،ایران.