Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

fa بررسی اثر نانوذرات نقره روی بیان ژن rmtB در جدایه‌های بالینی مقاوم به آمینوگلیکوزید در باکتری سودوموناس آئروژینوزا Effect of silver nanoparticles on rmtB gene expression in aminoglycoside resistant clinical isolates in Pseudomonas aeruginosa میکروب‌شناسی Microbiology پژوهشی Original سابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصت‌طلب است که عفونت گسترده‌ای در بیمارستان‌ها ایجاد می‌کند. به دلیل استفاده بی‌رویه‌ از آنتی‌بیوتیک‌ها، سودوموناس آئروژینوزا به انواع آنتی بیوتیک‌ها مقاوم شده است. یکی از انواع مقاومت‌های کسب شده توسط این باکتری، مقاومت به داروهای آمینوگلیکوزید است. مهم‌ترین مکانیسم این مقاومت غیرفعال‌سازی آنزیماتیک آمینوگلیکوزیدها توسط آنزیم‌های تغییردهنده آن‌هاست. ژن rmtB در این مقاومت نقش دارد و به دلیل اینکه نانوذرات نقره خاصیت ضدباکتریایی دارند، هدف این مطالعه ارزیابی سطح بیان ژن‌ rmtB در نمونه‌های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم شده‌ای است که تحت تیمار نانوذرات نقره بوده‌اند. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، 53 نمونه از 11 آزمایشگاه سطح شهر مشهد در سال‌های ۱۳۹9-۱۳۹8 جمع‌آوری شدند. نمونه‌ها با استفاده از روش‌های استاندارد آزمایشگاهی و کشت اختصاصی تعیین هویت شدند. برای بررسی فراوانی ژن rmtB از روش PCR استفاده شد. برای ارزیابی الگوی حساسیت آنتی‌بیوتیکی سویه‌ها، از روش انتشار دیسک بر اساس پروتکل (2018)CLSI استفاده شد. نانوذرات نقره توسط عصاره زنجبیل ساخته شدند و برای بررسی اثر نانوذرات نقره بر بیان ژن  rmtBاز روش Real time PCR استفاده شد. میزان مقاومت با آنتی بیوتیک‌های مختلف با آزمون کای دو قضاوت آماری شد. یافته‌ها: از 53 نمونه سودوموناس آئروژینوزا، 51 نمونه به بیش از دو آمینوگلوکوزید مقاوم بودند. ارزیابی فنوتیپی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه‌های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به آمینوگلوکوزیید نشان داد که 61 درصد به آمیکاسین، 84 درصد به جنتامایسین و 23 درصد به توبرامایسین مقاومت داشتند. همچنین از 53 نمونه، 76 درصد به هر سه آمینوگلیکوزید بررسی‌شده مقاوم بودند. حداقل غلظت بازدارندگی در روش رقت در آگار برای نانوذرات نقره تا رقت 500 میکروگرم بر میلی‌لیتر بود. بررسی ملکولی نشان‌دهنده حضور ژن rmtB در تمام نمونه‌ها بود و نتیجه بررسی Real time PCR نشان داد که تاثیر نانوذرات نقره روی بیان ژن rmtB معنادار است (P<0/01). نتیجه‌گیری: مقاومت بالایی نسبت به آمینوگلیکوزید در نمونه‌های جمع‌آوری شده از شهر مشهد وجود داشت. نانوذرات نقره تاثیر معنادار روی کاهش بیان ژن rmtB داشتند.   Background and Aim: Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen that causes widespread infections in hospitals. Pseudomonas aeruginosa has become resistant to a variety of antibiotics due to the overuse of antibiotics. One type of resistance acquired by this bacterium is resistance to aminoglycoside drugs. The most important mechanism of this resistance is the enzymatic inactivation of aminoglycosides by their modifying enzymes. The rmtB gene is involved in this resistance and because silver nanoparticles have antibacterial properties, the present study was conducted to evaluate the expression level of rmtB gene in Pseudomonas aeruginosa specimens treated with silver nanoparticles. Methods: In the current study experimental, 53 samples were collected from 11 laboratories in Mashhad during 1398-1399. Samples were identified using standard laboratory methods and specific culture. PCR method was used to evaluate the frequency of rmtB gene. In order to evaluate the antibiotic susceptibility pattern of the strains, the disk diffusion method based on the CLSI protocol (2018) was used. Silver nanoparticles were made from ginger extract and Real time PCR was used to investigate the effect of silver nanoparticles on rmtB gene expression. Results: Out of 53 samples of Pseudomonas aeruginosa, 51 samples were resistant to more than two aminoglucosides. Phenotypic evaluation of the antibiotic resistance pattern of aminoglucoside-resistant Pseudomonas aeruginosa strains showed that 61% were resistant to amikacin, 84% to gentamicin and 23% to tobramycin. Also, out of 53 samples, 76% were resistant to all three aminoglycosides. The minimum inhibitory concentration in the agar dilution method for silver nanoparticles was up to 500 μg/ml. Molecular analysis showed the presence of rmtB gene in all samples and the result of real time PCR analysis showed that the effect of silver nanoparticles on rmtB gene expression was significant (P <0.01). Conclusion: There was high resistance to aminoglycoside in samples collected from Mashhad. Silver nanoparticles had a significant effect on reducing the expression of rmtB gene (P <0.01). سودوموناس؛ نانوذره؛ آنتی‌بیوتیک, ایران, مشهد. Pseudomonas, Nanoparticles, Antibiotics, Iran, Mashhad 1 10 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4343-1&slc_lang=fa&sid=1 Bager Alkhikani باقر الخیکانی 100319475328460026984 100319475328460026984 No Department of Biology, Islamic Azad University, Mashhad Branch, Iran. گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران. Farahnaz Molavi فرحناز مولوی FARAHMOLAVI@GMAIL.COM 100319475328460026985 100319475328460026985 Yes Department of Biology, Islamic Azad University, Mashhad Branch, Iran. گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران. Maryam Tehranipour مریم طهرانی پور 100319475328460026986 100319475328460026986 No Department of Biology, Islamic Azad University, Mashhad Branch, Iran. گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران.