Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

fa ارزیابی اثر پپتید ضد میکروبی C‌liotide U1 بر مهار تشکیل بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس و کاهش بیان ژن‌های ALS1 و HWP1 Evaluation of the Antimicrobial Peptide Cliotide U1 on Inhibition of Candida albicans Biofilm Formation and Reduction of ALS1 and HWP1 Gene Expression قارچ شناسی Mucology پژوهشی Original <div style="text-align: justify;">سابقه و هدف: بیوفیلم‌های کاندیدا آلبیکنس به دلیل مقاومت ذاتی به داروهای ضدقارچی، یکی از چالش‌های اصلی در درمان عفونت‌های قارچی هستند. پپتیدهای ضد میکروبی با مکانیسم‌های اثر نوین، گزینه‌های درمانی امیدوارکننده‌ای محسوب می‌شوند. هدف این مطالعه، ارزیابی اثر پپتید Cliotide U1 بر مهار تشکیل بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس و بررسی تغییرات بیان ژن‌های کلیدی ALS1 و HWP1 بود. روش کار: مطالعه حاضر یک مطالعه تجربی برون‌تنی (in vitro experimental study) بود. فعالیت ضدقارچی پپتید علیه سویه استاندارد SC5314 و پنج سویه بالینی با روش رقت‌سازی در محیط مایع مطابق پروتکل CLSI M27-A4 تعیین شد. مهار تشکیل بیوفیلم و فعالیت متابولیک با روش‌های کریستال ویوله و XTT ارزیابی شد. همچنین، تغییرات بیان ژن‌های ALS1 و HWP1 با روش Real-Time PCR بررسی گردید. یافته‌ها: مقدار MIC پپتید Cliotide U1 برای سویه استاندارد کاندیدا آلبیکنس SC5314 و بیشتر سویه‌های بالینی 16 میکروگرم بر میلی‌لیتر بود و تنها در سویه CA2 مقدار MIC برابر با 32 میکروگرم بر میلی‌لیتر گزارش شد. همچنین مقادیر MFC در محدوده 32 تا 64 میکروگرم بر میلی‌لیتر قرار گرفت. مقدار BIC₅₀ پپتید در سویه استاندارد کاندیدا آلبیکنس SC5314 برابر با 32 میکروگرم بر میلی‌لیتر و در سویه‌های بالینی در محدوده 32 تا 64 میکروگرم بر میلی‌لیتر بود. نتایج رنگ‌آمیزی کریستال ویوله نشان داد که غلظت×MIC 2 نسبت به×MIC 1 موجب افزایش معنی‌دار مهار تشکیل بیوفیلم در تمامی سویه‌ها شد و میزان مهار در غلظت ×MIC2 بین 1 ± 49 تا 1 ± 61 درصد بود P = 0.0002) تا .(P = 0.0060 همچنین در سنجش XTT، غلظت×MIC 2 موجب کاهش 7/6 ± 54/7 تا 2/5 ± 67/7 درصد فعالیت متابولیک سلول‌های درون بیوفیلم شد و این افزایش نسبت به×MIC 1 از نظر آماری معنی‌دار بود.P = 0.0012 تا .(P = 0.0280 نتایج Real-Time PCR نیز نشان داد که پپتید Cliotide U1 موجب کاهش معنی‌دار بیان ژن‌های ALS1 و HWP1 شد( .(P < 0.05 نتیجه‌گیری: پپتید Cliotide U1 دارای فعالیت ضدقارچی و توانایی مهار تشکیل بیوفیلم است و می‌تواند به‌عنوان کاندیدای امیدوارکننده برای مطالعات تکمیلی در زمینه کنترل عفونت‌های مقاوم و مرتبط با بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس مطرح شود. بررسی‌های بیشتر درون‌تن برای تأیید اثربخشی این پپتید ضروری است.</div> <div style="text-align: justify;">Background and Aim: Candida albicans biofilms pose a major challenge in antifungal therapy due to their intrinsic drug resistance. Antimicrobial peptides with novel mechanisms of action are considered promising therapeutic candidates. This study aimed to evaluate the effect of the peptide Cliotide U1 on C. albicans biofilm formation and assess changes in the expression of the key genes ALS1 and HWP1. Methods: The present study was an in vitro experimental study. The antifungal activity of the peptide was tested against the standard strain SC5314 and five clinical isolates using broth microdilution according to CLSI M27-A4. Biofilm formation and metabolic activity were assessed using crystal violet and XTT assays, respectively. Changes in ALS1 and HWP1 gene expression were measured by real-time PCR. Results: The MIC of Cliotide U1 against the standard C. albicans strain SC5314 and most clinical isolates was 16 µg/ mL, while only isolate CA2 showed an MIC of 32 µg/ mL. The MFC values ranged from 32 to 64 µg/ mL. The BIC₅₀ of the peptide was 32 µg/ mL for the standard C. albicans strain SC5314 and ranged from 32 to 64 µg/ mL among the clinical isolates. Crystal violet staining showed that treatment with 2×MIC significantly increased biofilm inhibition compared with 1×MIC in all tested strains, with inhibition percentages at 2×MIC ranging from 49.0 ± 1.0% to 61.0 ± 1.0% (P = 0.0002 to P = 0.0060). In the XTT assay, treatment with 2×MIC inhibited the metabolic activity of biofilm- embedded cells by 54.7 ± 7.6% to 67.7 ± 2.5%, and this increase was statistically significant compared with 1×MIC (P = 0.0012 to P = 0.0280). Real-time PCR results also showed that Cliotide U1 significantly reduced the expression levels of ALS1 and HWP1 genes (P < 0.05). Conclusion: Cliotide U1 exhibits antifungal and antibiofilm activity and may serve as a promising candidate for further studies on controlling resistant and biofilm- associated C. albicans infections. Additional in vivo studies are needed to confirm its efficacy.</div> Cliotide U1, کاندیدا آلبیکنس, بیوفیلم,ALS1, HWP1, پپتید ضد میکروبی, بیان ژن, BIC₅₀ Cliotide U1, Candida albicans, Biofilm, ALS1, HWP1, Antimicrobial peptide, Gene expression, BIC₅₀ 0 0 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5119-2&slc_lang=fa&sid=1 Niloufar Radmanesh نیلوفر رادمنش 100319475328460033800 100319475328460033800 No Department of Biology, SR.C, Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه زیست‌شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. Zahra Jahanshiri زهرا جهانشیری zjahanshiri@yahoo.com 100319475328460033801 100319475328460033801 No Department of Mycology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. گروه قارچ‌شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران. Sima Sadat Seyedjavadi سیما السادات سیدجوادی sima_seyedjavadi@yahoo.com 100319475328460033802 100319475328460033802 No Department of Mycology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. گروه قارچ‌شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران. Mehdi Goudarzi مهدی گودرزی gudarzim@yahoo.com 100319475328460033803 100319475328460033803 Yes Department of Microbiology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران.