Gholami Arjenak V, Mozhgani S H R M, Miandeh, N, Janani A R, Ajorloo M, Zavareh A R, et al . Production of rabies fluorescent antibody conjugated and determination of its function. Research in Medicine 2013; 36 (4) :167-172
URL:
http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-1088-fa.html
غلامی ارجنکی وحید، مژگانی سید حمید رضا، میاندهی نرگس، جنانی علیرضا، آجورلو مهدی، زوارهء علیرضا، و همکاران. و همکاران.. ساخت آنتی بادی فلورسنت علیه ویروس هاری و بررسی کارایی آن . پژوهش در پزشکی. 1391; 36 (4) :167-172
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-1088-fa.html
بخش تولید واکسن های ویروسی، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران ، agholami@pasteur.ac.ir|
چکیده: (10904 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به مطرح بودن بیماری هاری و اهمیت آنتیبادی ضد ویروس هاری کونژوگه شده با ماده فلورسنت و اینکه آنتیبادی فعلی کشور وارداتی و دارای قیمت نسبتاً بالایی میباشد و برای پاسخ به این سوال که آیا امکان ساخت آنتی بادی فلورسنت ضد ویروس هاری وجود دارد یا خیر، و در صورتی که پاسخ مثبت باشد آیا کارایی لازم را دارد، تحقیق حاضر انجام گرفت.
روش بررسی: تحقیق در مرحله اول به روش اکتشافی و در مرحله بعد به روش تجربی انجام گرفت. بعد از خونگیری و جدا سازی سرم خرگوش های ایمن شده با واکسن هاری، سرم بدست آمده توسط آمونیوم سولفات رسوب داده شده و تحت فیلتراسیون به کمک ژل قرار گرفت. در قدم بعدی برای تخلیص IgG، کروماتوگرافی تعویض یونی انجام گرفت. در مرحله بعد برای تایید وجود آنتی بادی و اختصاصیت آن از تکنیک Dot blotting استفاده شد. بعد از تایید در این مرحله، آنتی بادی تخلیص شده با فلورسئین ایزو تیوسیانات(FITC) کونژوگه شده و در تست ایمونو فلورسنت اختصاصیت، درخشندگی و شفافیت کافی، به عنوان قابل قبول تلقی شد.
یافتهها: بیشترین میزان IgG در بافر با غلظت mM100 نمک NaCl (Flow Through) از ستون کروماتوگرافی تعویض یونی خارج شد. نمونه 100 میلی مولار حاوی IgG بهتر و بیشتر با فلورسئین ایزو تیوسیانات پیوند کووالان برقرار کرده وکونژوگه شد.
نتیجهگیری: نتایج نشان میدهد که این آنتی بادی قادر به نشان دادن علائم حضور ویروس در نمونه مغز حیوان هار است. به نظر میرسد که می توان تهیه آنتی بادی فلورسنت ضد ویروس هاری را در پژوهش های بعدی بهینه و در صورت تایید برای تولید انبوه اقدام کرد.
واژگان کلیدی: فلورسئین ایزوتیوسیانات، تست ایمونوفلورسنت، فیلتراسیون به کمک ژل، Dot blotting، کروماتوگرافی تعویض یونی.
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
بین رشته ای ( مدیریت آموزشی، تحقیقات آموزشی، آموزش پزشکی ) دریافت: 1391/12/26 | انتشار: 1391/11/27
ارسال پیام به نویسنده مسئول