گروه ژنتیک مولکولی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوریبخش تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ، maryam@nigeb.ac.ir
چکیده: (12678 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به موانع کاربرد بالینی سلولهای بنیادی جنینی در پزشکی ترمیمی و امکان استفاده از سلولهای بنیادی بزرگسالان به ویژه سلولهای بنیادی مزانشیمی بافت چربی، بافت چربی به عنوان منبع سلولی مناسبی جهت سلول درمانی مطرح شده است. نظر به هزینه بالای استخراج متداول این سلولها از بافت چربی با استفاده از کلاژناز نوع 1 و 4، هدف از انجام این مطالعه بررسی امکان استفاده از آنزیم های مقرون به صرفه با بازدهی مناسب به عنوان جایگزینی برای این آنزیم بود.
روش بررسی: فاز اول مطالعه به صورت اکتشافی انجام گرفت و در مرحله دوم، برای افتراق سلولهای بنیادی مزانشیمی از بافت چربی انسانی مطالعه تجربی صورت گرفت. بافت چربی گرفته شده از جراحی لیپوساکشن در شرایط استریل به آزمایشگاه انتقال و مقدار مشابهی از بافت در گروه های مختلف تحت تأثیر آنزیم های مختلف در شرایط یکسان از نظر دمایی و زمانی قرار داده شد. سلول های حاصل از نظر مورفولوژی، تراکم و سرعت رشد، بیان مارکرهای سطحی ویژه و توانایی تمایز پذیری بررسی شدند.
یافتهها: در کشت اولیه مقدار سلول استخراج شده در بین گروه ها تفاوتهایی را نشان داد، اما پس از اولین پاساژ، تفاوتی از نظر رشد و یا قابلیت سلولها در بیان مارکرهای سطحی و تمایز پذیری مشاهده نشد. در آنالیز فلوسیتومتری، بیش از 95 درصد سلولها نسبت به بیان مارکرهای مزانشیمی CD105 ,CD90 ,CD73 مثبت بودند. در تمامی گروهها سلولها قابلیت تمایز به ردههای سلولی چربی و استخوانی را داشتند.
نتیجهگیری: در این تحقیق برای اولین بار نشان دادیم که استخراج سلولهای بنیادی مزانشیمی از بافت چربی انسان بدون نیاز به آنزیم کلاژناز خالص و با استفاده از آنزیم کلاژناز ترکیبی به اضافه تریپسین که به مراتب در دسترس تر و مقرون به صرفه تر است، امکان پذیر میباشد و توان تمایزی و کیفیت رشد سلول های حاصله مشابه با سلول های استخراج شده با استفاده از آنزیمهای خالص است.
واژگان کلیدی: سلولهای بنیادی مزانشیمی، بافت چربی، آنزیم کلاژناز، هضم آنزیم.
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
بین رشته ای ( مدیریت آموزشی، تحقیقات آموزشی، آموزش پزشکی ) دریافت: 1391/1/5 | انتشار: 1390/11/26