fa بررسی قدرت PCR در تشخیص کریپتوسپوریدیوم در کودکان مبتلا به اسهال انگل شناسی Parasitology پژوهشی Original <strong>سابقه و هدف:</strong> روش تشخیص انگل کریپتوسپوریدیوم، تهیه گسترش از مدفوع، رنگ آمیزی ذیل نلسون و مشاهده اووسیست است. تشخیص، توسط این روش نیاز به تعداد بالای اووسیست در هر گرم مدفوع، زمان بیشتر جهت بررسی و مهارت تکنسین دارد، تا کنون در ایران مطالعه‌ای جهت ارزیابی قدرت روش PCR و رنگ آمیزی ذیل نلسون به عنوان روش استاندارد صورت نگرفته است. لذا در این مطالعه، PPV و NPV روش PCR و روش رنگ آمیزی ذیل نلسون اصلاح شده (MZN) در تشخیص کریپتوسپوریدیوم در کودکان مبتلا به اسهال مراجعه کننده به بیمارستان تعیین گردید.<br> <strong>روش بررسی:</strong> این مطالعه به روش تشخیصی انجام گرفت. تعداد 2500 نمونه مدفوع از کودکان مبتلا به اسهال گرفته و از آنها گسترش تهیه شد و بعد از رنگ آمیزی ذیل نلسون اصلاح شده (فوشین قلیایی به همراه حرارت، رنگ بر و متیلن بلو) با میکروسکوپ بررسی شدند. بر روی نمونه‌های مثبت و تعدادی از نمونه‌های منفی، عمل استخراج DNA انجام شد و توسط روش PCR، آلودگی به کریپتوسپوریدیوم تشخیص داده شد و ارزش اخباری مثبت (PPV) و منفی (NPV) هر دو روش مورد بررسی قرار گرفت.<br> <strong>یافته‌ها</strong>: روش ذیل نلسون اصلاح شده توانست از 2500 نمونه، 30 مورد مثبت تشخیص دهد که همگی آنها توسط روش PCR نیز مثبت اعلام شدند و هیچ مورد مثبت کاذب توسط روش رنگ آمیزی مشاهده نشد. از موارد منفی نیز، 2 مورد مثبت توسط PCR تشخیص داده شد که نشان دهنده منفی کاذب توسط روش رنگ آمیزی بود، PPV و NPV روش رنگ‌آمیزی به ترتیب 1/94% و100% و PPV و NPV روش PCRنیز 100% اعلام شد.<br> <strong>نتیجه‌گیری</strong>: روش PCR قدرت لازم را در تشخیص کریپتوسپوریدیوم دارد و به عنوان روش تشخیصی دقیق، به ویژه در افراد دارای نقص در سیستم ایمنی، معرفی می‌شود، اما با توجه به قدت تقریبا بالای روش MZN و در دسترس بودن آن در اکثر آزمایشگاه‌ها، استفاده از این روش جهت تشخیص در کودکان دارای ایمنی سالم، کافی و مفید به نظر می‌رسد.&nbsp; &nbsp;<strong>Background</strong>: Usual diagnostic methods for detection of Cryptosporidium include smear preparation, modified Zeihl-Neelsen staining, microscopic examination and observation of oocysts. No studies have been done to compare PCR and Zeihl-Neelsen staining in Iran. This study was done to determine the positive predictive value, (PPV) and the negative predictive value (NPV) of PCR in comparison to modified Zeihl-Neelsen staining for isolation of Cryptosporidium in children with diarrhea.<br> <strong>Materials and methods:</strong> Direct smears were prepared from fecal samples of 2500 children with diarrhea. Smears were stained by modified Zeihl-Neelsen method and examined by microscope. All samples positive for cryptosporidia and some randomized negative samples were selected for DNA extraction for PCR assay.<br> <strong>Results</strong>: From 2500 fecal samples, 30 positive cases were detected by modified Zeihl-Neelsen, (Z-N) staining these tested positive by PCR method too however two samples, found to be negative on microscopic examination were positive by PCR technique. PPV and NPV of microscopic examination after staining with Z-N were computed as 94.1% and 100%, PPV and NPV of PCR method were computed as 100%.<br> <strong>Conclusion</strong>: PCR is a sensitive technique for detection of Cryptosporidium, especially useful in immunocompromised individuals.&nbsp; کریپتوسپوریدیوم,ذیل نلسون اصلاح شده,PCR Cryptosporidium, modified Zeihl-Neelsen, PCR 35 40 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-657&slc_lang=fa&sid=1 Nima Salehi نیما صالحی 100319475328460030634 100319475328460030634 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی Somayyeh Aghamolayi سمیه آقا ملایی 100319475328460030635 100319475328460030635 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی Niloufar Taghipour نیلوفر تقی پور 100319475328460030636 100319475328460030636 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی Ali Haghighi, علی حقیقی 100319475328460030637 100319475328460030637 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی Alireza Abadi علیرضا ابدی 100319475328460030638 100319475328460030638 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی Farid Tahvildar Biderouni فرید تحویلدار بیدرونی faridtahvildar@yahoo.com 100319475328460030639 100319475328460030639 Yes Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی