fa بررسی بیان ژن های IL4، TNFα، TGFβ و IFNγ در تائید پلاریزاسیون ماکروفاژهای M1 و M2 حاصل از کشت مونوسیت های انسانی ایمنی‌شناسی Immunology پژوهشی Original <p>مقدمه: ماکروفاژ های کلاسیک (M1) و آلترناتیو (M2) عملکردهای مختلفی را درمقابله با عفونت ها به عهده دارند.درجریان پاسخ ایمنی در مقابل BCGماکروفاژهای M&rlm;1 ودربیماری هیداتیدوزماکروفاژهای M2فعال میشوند.درمکانیسم های تنظیم ایمنی پلاریزاسیون این جمعیت اساس هومئوستاز را تشکیل میدهد. یکی از راه های تائید پلاریزاسیون ،بیان سایتوکاین های IFN&gamma; و TNF&alpha; برای فنوتیپ M1 و TGF&beta; جهت فنوتیپ M2 می باشد. هدف از این مطالعه بررسی بیان ژن این سایتوکاین ها در جهت تائید پلاریزاسیون ماکروفاژهای تحریک شده با BCG ومایع کیست هیداتید باروردر شرایط آزمایشگاهی بوده است.بیان ژن IL4که اخیرا&quot;تولیدآن توسط رده منوسیتی ماکروفاژی گزارش گردیده است موردبررسی قرارگرفت. مواد و روشها: تک هسته ای های خون محیطی باروش بکارگیری از گرادیان غلضتی فایکول تخلیص وجداسازی شد. جمعیت مونوسیتی_ماکروفاژی باتکنیک چسبندگی از سلولهای شناور در محیط کامل کشت سلول تفکیک گردید. به مدت 8 ساعت ماکروفاژها با محرک های B&rlm;CG و مایع کیست هیداتید بارور تیمار گردید. به منظور تایید پلاریزاسیون ماکروفاژی ، بیان سایتوکاینهای اختصاصی با استفاده از RT-PCR و بررسی توالی تکثیر یافته، در مقایسه با نمونه کنترل مورد مقایسه قرار گرفت. نتایج: تکثیر ژن های اختصاصی سایتوکاین های هر گروه نشان دهنده تائید فرایند پلاریزاسیون بود.ماکروفاژهای بامحرکBCGبیان افزایش داشته ای رااز IFN-&gamma;و TNF-&alpha;نشان دادند.درگروه باتحریک مایع کیست بارور هیداتیدبیان ژنTGF-&beta;مشهود بود.ژن IL4نیزدراین جمعیت ملاحظه گردید. همچنین عدم مشاهده محصول PCR در نمونه کنترل نشان دهنده عدم و یا بیان بسیار کم ژن مذکور در گروه کنترل می باشد. نتیجه گیری: توانایی BCG و مایع کیست هیداتید بارور در القا پلاریزاسیون ماکروفاژها می تواند در مطالعات تجربی مرتبط با تمایز ماکروفاژی مورد استفاده قرار گیرد. تاکیدبرکارآیی این روش ساده وکم هزینه در مقایسه بابکارگیری ازکیت های پرهزینهء تمایز ماکروفاژی نیاز به پژوهش های تکمیلی دارد.</p> <div style="text-align: left direction: ltr">background: Classical macrophages (M1) and alternative macrophages (M2) are responsible for various functions in order to maintain homeostasis. BCG vaccine and hydatid cyst fluid can be examples of stimulants which can cause M1and M2 macrophage polarization. Evaluating the expression of markers such as IFN&gamma; and TNF&alpha; for M1 phenotype and TGF&beta; and IL4 for M2 phenotype is one of the confirmatory ways of polarization. The purpose of this study was to verify the polarization of macrophages which were induced by BCG vaccine and hydatid cyst fluid by studying the gene expression of aforementioned markers. Methods: Diluted heparin fresh venous blood was layered by ficol 1077 and then peripheral blood mononuclears were separated by gradient concentration. Monocyte populations were separated by adhesion technique from floating cells in RPMI medium. Derived macrophages were treated by BCG vaccine and hydatid cyst fluid for 8 hours. RT-PCR was performed for confirming the polarization and the expression of amplified genes were compared with control groups. Results: Amplification of TNF&alpha; and IFN&gamma; genes in M1 group and TGF&beta; and IL4 in M2 group confirmed the polarization procedure. Also, lack of PCR product in negative control samples indicates the absence or a very low expression of this gene in control group. Conclusion: The ability of these stimulants in macrophage polarization can be used in experimental studies. It is also possible to take advantage of this model to achieve useful goals in cell therapy and develop more efficient therapeutic methods in inflammatory diseases and cancer immunotherapy.</div> پلاریزاسیون ماکروفاژ M1 ,M2, BCG,مایع کیست بارورهیداتید, Classical macrophages, Alternative macrophages. BCG, Hydatid Cyst Fluid. RT-PCR 9 13 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-861-1&slc_lang=fa&sid=1 Arsalan Jalili ارسلان جلیلی jalili.arsalan@yahoo.com 100319475328460029852 100319475328460029852 Yes Islamic Azad university, east Tehran branch دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شرق Elham Moslemi الهام مسلمی elham_moslemi60@yahoo.com 100319475328460029853 100319475328460029853 No Islamic Azad university, east Tehran branch دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شرق Amir Izadi امیر ایزدی amir_izad@yahoo.com 100319475328460029854 100319475328460029854 No Islamic Azad university, east Tehran branch دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شرق Nariman Mosaffa نریمان مصفا narimanmosaffa@gmail.com 100319475328460029855 100319475328460029855 No Faculty of Medicine, shahid Beheshti University of Medical Sciences دانشکده علوم پزشکی دانشگاه شهید بهشتی