Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

fa بررسی مولکولی سویه مایکوباکتریوم های جدا شده از ترشحات لنفاوی کودکان مبتلا به لنفادنیت ناشی از واکسیناسیون با واکسن BCG Molecular Characterization of Mycobacterium Strains Isolated from Children with BCG Induced Lymphadenitis میکروب‌شناسی Microbiology پژوهشی Original <div style="text-align: right"> سابقه و هدف: در ایران واکسیناسیون با باسیل کلمت و گرین(ب ث ژ) در نوزادان برای پیشگیری از بیماری سل در بدو تولد انجام می‌شود. واکسن( ب ث ژ) یک واکسن زنده ضعیف شده است که از سویه‌های ژنتیکی مختلف مایکوباکتریوم بوویس تهیه می‌شود. این واکسن ایمن است اما به دنبال واکسیناسیون، واکنش‌های موضعی مانند آبسه در محل تزریق و لنفادنیت به عنوان شایع‌ترین عوارض واکسن در بعضی از کودکان سالم مشاهده می‌شود.عوارض شدید و سیستمیک در کودکان با سیستم ایمنی سالم به ندرت دیده می‌شود، ولی لنفادنیت در ایران و سایر کشورها با شیوع به نسبت زیادی در کودکان با سیستم ایمنی سالم نیز دیده می‌شود. ازآنجاکه تحقیقات نشان داده که میزان این عوارض با نوع سویه واکسن و تغییر ژنتیکی آن در ارتباط است، در این تحقیق سویه‌های مایکوباکتریوم جدا شده از کودکان مبتلا به لنفادنیت از لحاظ  گونه و سویه باکتری بررسی شدند. روش بررسی: 30 نوزاد باعلائم لنفادنیت ناشی از واکسن (ب ث ژ) برای این تحقیق انتخاب شدند.  پس از آسپیراسیون ترشحات از ضایعات مراحل رنگ‌آمیزی اسیدفست و کشت روی محیط لوون اشتاین جانسون انجام شد. سپس استخراج &rlm;DNA&rlm; از نمونه ها به روش فنل کلروفرم انجام وبا استفاده از  PCR ژن 16sRNA جنس باکتری مشخص شد. برای تعیین گونه و سویه باکتری ها از پرایمرهایRD14, DU1 و  RD1 و در مرحله بعد از پرایمرهای RD9، RD4Deleted، RD4Present و RD1Deletedاستفاده شد. یافته ها: همگی۳۰ نمونه باسیل اسیدفست که از کودکان مبتلا به لنفادنیت ناشی از واکسن BCG جدا شده بودند با استفاده از روش PCR  ژن 16sRNA به عنوان جنس مایکوباکتریوم شناخته شدند. سپس با استفاده از PCR ژنهای RD4, DU1,RD14, RD9,RD1 Deleted، RD4Present و RD1Deleted تمامی۳۰ نمونه به عنوان مایکوباکتریوم بوویس (BCG) سویه پاستور مورد شناسایی قرار گرفتند. نتیجه گیری: با توجه به اینکه ۱۰۰% از نمونه های مایکوباکتریوم های جدا شده از لنفادنیت کودکان در این مطالعه به عنوان مایکوباکتریوم بوویس (ب ث ژ)  سویه پاستور شناخته شدند،  میتوان اینگونه نتیجه گیری کرد که ایجاد لنفادنیت در کودکان به دنبال واکسیناسیون با واکسن (ب ث ژ)  بیشتر ناشی از عوامل دیگر از جمله مقدار واکسن مصرفی، روش تزریق و پاسخ های التهابی سیستم ایمنی این کودکان نسبت به واکسن می باشد.   </div> Background and Aim: In Iran vaccination with Bacillus Calmette-Guérin (BCG) is performed on all newborns within the first days of life for prevention of tuberculosis. It is a live attenuated vaccine and produced from genetically different vaccine strains of Mycobacterium bovis. This vaccine is safe but local adverse reactions such as administration site abscess and lymphadenitis occur in some healthy children vaccinated with this vaccine as the most common side effect of BCG vaccination. Disseminated BCG infections are very rare in immunocompetent children but lymphadenitis is very common in Iran and other countries. It is indicated that the vaccine strain and it’s genetically variations are correlated with these side effects. Therefore, in this study we aimed to analyze the genetic characterizations of vaccine strains used in Iran. Materials and Methods: Thirty infants showing lymphadenitis induced by BCG vaccination were chosen for this study. After aspiration from the lesions, they were subjected to acid fast staining and culture on Lowenstein Jensen medium.  Subsequently, DNA was extracted from samples using Phenol–chloroform method.  The genus of the isolates was characterized by primer for 16sRNA gene. Then using RD1, RD14 and DU1 primers and in the next step RD9, RD4Deleted, RD4Present and RD1Deleted primers the species and strains of the isolates were characterized. Results: Performing 16sRNA PCR, all 30 samples of acid fast bacilli were confirmed as Mycobacterium genus. Then using RD1, RD14, DU1, RD9, RD4 Deleted, RD4 Present and RD1 Deleted primers all isolates were detected as Mycobacterium bovis BCG strain Pasteur. Conclusion: In this study all of the strains isolated from the patients were detected as Mycobacterium bovis BCG strain Pasteur. Therefore, the other possible factors causing BCG complications including BCG overdose, faulty intradermal technique, and disturbance of cellular immunity should be considered as the other risk factors of causing lesions. بیماری سل, مایکوباکتریوم بوویس, واکسن BCG , لنفادنیت, نوزادان. Mycobacterium bovis BCG vaccine, Lymphadenitis, Tuberculosis, Infants. 30 35 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-872-2&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Shahi فاطمه شاهی f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029862 100319475328460029862 No Department of Microbiology,School of medicine, Shahid Beheshti University of Medical sciences, Tehran, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهرلن، ایران. Fatemeh Fallah فاطمه فلاح f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029863 100319475328460029863 No Department of Microbiology,School of medicine, Shahid Beheshti University of Medical sciences, Tehran, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهرلن، ایران. Hossein Goudarzi حسین گودرزی f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029864 100319475328460029864 No Department of Microbiology,School of medicine, Shahid Beheshti University of Medical sciences, Tehran, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهرلن، ایران. Maryam Baniasad مریم بنی اسد f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029865 100319475328460029865 No School of Pharmacy, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran. دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران. Bahman Pourabbas بهمن پورعباس f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029866 100319475328460029866 No Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran. مرکز تحقیقات میکروب شناسی بالینی استاد البرزی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران. Alireza Mohammadzade علیرضا محمد زاده f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029867 100319475328460029867 No Department of Microbiology,School of medicine, Gonabad University of Medical sciences, Gonabad, Iran گروه میکروبیولوژی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گناباد، گناباد، ایران. Farahnoosh Doustdar فرحنوش دوستدار f_doustdar@yahoo.com 100319475328460029868 100319475328460029868 Yes Department of Microbiology,School of medicine, Shahid Beheshti University of Medical sciences, Tehran, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهرلن، ایران.