Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

fa بررسی اثر تماس مستقیم سلولهایT بکر با سلولهای فیبروبلاست تحریک شده با BCG بر القای سلولهایT تنظیمی Study the effect of cell-to-cell contact of naive T cells and BCG stimulated fibroblasts on regulatory T cell induction ایمنی‌شناسی Immunology پژوهشی Original   سابقه و هدف: فیبروبلاست‌های استرو مایی گره لنفی در ارتباط تنگاتنگ با سلول‌های CD4+ T قرار دارند و بر فنوتیپ و عملکرد آن‌ها اثر می‌گذارند. آگاهی از نحوه میان کنش این سلول ها به‌ویژه در شرایط ناپایدار همچون عفونت‌ها، به استفاده‌های بعدی از آن‌ها در کنترل و تنظیم پاسخ‌های ایمنی کمک خواهد کرد. روش بررسی: سلول‌های فیبروبلاست گره لنفی به دو روش in vitro و in vivo، در محیط ایمنی واجد BCG، قرار داده شدند. فیبروبلاست‌ها به روش هضم آنزیمی و مارکرهای اختصاصی سطحی، جداشدند و به مدت 72 ساعت با لنفوسیت‌های T بکر به روش تماس مستقیم هم‌کشتی شدند. سپس لنفوسیت‌های T جدا شدند و پس از 72 ساعت کشت از نظر میزان بیان مارکرهای T تنظیمی و سایتوکاین‌های IL-10, TGF-β1, IL-4 و IFN-γ بررسی شدند. یافته‌ها: میزان القای سلول‌های T تنظیمی توسط فیبروبلاست‌های تحریک شده با BCG در روش in vivo بیش از فیبروبلاست‌های تحریک نشده است. در این روش میزان سایتوکاین IFN-γ کاهش و سایتوکاین‌های تنظیمی TGF-β1 و IL-10 افزایش داشت. درحالی‌که میزان القای سلول‌های T تنظیمی توسط فیبروبلاست‌های تحریک شده با BCG در روش in vitroبه‌طور  معناداری کمتر از فیبروبلاست‌های تحریک نشده بود. در این روش علاوه بر سایتوکاین تنظیمی IL-10، سایتوکاین IFN-γ نیز افزایش داشت که نشان‌دهنده القای جمعیت سلول‌های T مولدIFN-γ است. نتیجه‌گیری: سلول‌های فیبروبلاست نه‌تنها بر القای سلول‌های T تنظیمی از سلول‌های T بکر و عملکرد لنفوسیت‌های T اثر می‌گذارند، میان کنش آن‌ها با لنفوسیت‌های T متاثر از محیط است. در این بررسی فیبروبلاست‌ها در دو محیط ایمنی متفاوت در حضور BCG قرار داشتند که در روشin vivo، به افزایش پاسخ تنظیمی و در روشin vitro به کاهش سلول‌های T تنظیمی منجر شد. به نظر می رسد تفاوت رفتار فیبروبلاست‌ها در مراحل مختلف عفونت باشد. Background: Lymph node stromal fibroblasts are interconnected with TCD4+ cells and affect their phenotype and function. Understanding the nature of these interactions under unusual conditions like infections will help to their application in control and regulation of immune responses. Materials and methods: Lymph node fibroblasts were affected in BCG primed immune environment by both in-vitro and in vivo method. Fibroblasts isolated through enzymatic digestion and surface markers and co-cultured with spleen isolated naive T cells for 72-hours in a cell-to-cell contact manner. Then naive T cells were removed and cultured 72-hours more and assessed for regulatory T cell marker expression and IL-4, TGF-β1, IL-10 and IFN-γ cytokine production. Results: Results showed that in in-vivo stimulation method, more regulatory T cells was induced by BCG stimulated fibroblasts compared to non-stimulated fibroblasts. In this method, IFN-γ cytokine production was reduced and IL-10 and TGF-β1 regulatory cytokine production was increased. In contrast, in in-vitro stimulation method, regulatory T cell induction by BCG stimulated fibroblasts was significantly less than non-stimulated ones. In addition, both IL-10 and IFN-γ production was increased that indicate induction of IFN-γ producing T-cells. Conclusion: Present study shows that fibroblasts affect regulatory T-cell induction and T-cell function. The result of this effect is dependent to environment. In this study, fibroblasts were isolated from two different BCG stimulated immune environment. They induced more regulatory responses in in-vivo condition and reduced regulatory responses in in-vitro environment. This result demonstrates different fibroblast behavior at different phases of infection. فیبروبلاست, لنفوسیت T تنظیمی, BCG Fibroblast, regulatory Tcell, BCG 169 176 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2263-1&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Jalali shirazi فاطمه جلالی شیرازی jalalishirazi.f@gmail.com 100319475328460030023 100319475328460030023 No Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس،دانشکده علوم پزشکی،گروه ایمنی شناسی Ahmad Zavaran Hosseini احمد زواران حسینی zavarana@modarees.ac.ir 100319475328460030024 100319475328460030024 Yes Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس،دانشکده علوم پزشکی،گروه ایمنی شناسی Sara Soudi سارا صعودی soudi@modares.ac.ir 100319475328460030025 100319475328460030025 No Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس،دانشکده علوم پزشکی،گروه ایمنی شناسی Shahrzad Noujedehi شهرزاد نوجه دهی Shahrzadnojedehi@gmail.com 100319475328460030026 100319475328460030026 No Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس،دانشکده علوم پزشکی،گروه ایمنی شناسی