fa بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی ایزوله های کلبسیلاپنومونیه و میزان بیان ژنهای Real-Time PCR بااستفاده ازacrA وoqxA میکروب‌شناسی Microbiology كاربردي Applicable <p dir="RTL"><strong>مقدمه:</strong> افزایش مقاومت ضد میکروبی در بین باکتری های گرم منفی خصوصا خانواده انتروباکتریاسه به مشکل جهانی تبدیل شده است و در نتیجه انتخاب های درمانی را محدود کرده است. کلبسیلا پنومونیه پاتوژن فرصت طلب گرم منفی است که به علت ایجاد طیف وسیعی از بیماریها و مقاومت آنتی بیوتیکی امروزه مورد توجه قرار گرفته است. پمپ های ترشحی به عنوان یکی از مکانیزم های مقاومت به آنتی بیوتیک ها در این باکتری مطرح است. لذا هدف از این مطالعه تشخیص ژن های <em><span dir="LTR">acrB, acrA, oqxA</span></em><span dir="LTR">, <em>oqxB</em></span> ، تعیین میزان بیان پمپ <em><span dir="LTR">acrA, oqxA</span></em> و بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در میان ایزوله های بالینی کلبسیلا پنومونیه جداشده از بیمارستان های تهران می باشد.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روشها:</strong> در مطالعه حاضر تعداد 83 کلبسیلا پنومونیه از بیماران مراجعه کننده به سه بیمارستان در تهران جمع آوری شدند. تست حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفوژن انجام شد. وجود یا عدم وجود ژن های مقاومت <em><span dir="LTR">acrA</span></em><span dir="LTR">,<em> oqxB, oqxA</em></span> و <em><span dir="LTR">acrB</span></em> با استفاده از تکنیک <span dir="LTR">PCR</span> بررسی شد. از <span dir="LTR">CCCP</span> به عنوان مهارکننده استفاده شد و سپس میزان بیان ژن های <em><span dir="LTR">oqxA</span></em> و <em><span dir="LTR">acrA</span></em> از طریق <span dir="LTR">Real-time PCR</span> بررسی شد.</p> <p><strong><span dir="RTL">نتایج:</span></strong><span dir="RTL"> نمونه های مقاوم به فلوروکینولون ها، به اکثر عوامل ضدمیکروبی استفاده شده در این مطالعه هم، مقاومت نشان دادند. اکثریت نمونه ها دارای پمپ های </span><em>OqxAB </em>(96%)<span dir="RTL"> و </span><em>AcrAB </em>(97%)<span dir="RTL"> بودند. استفاده از مهارکننده نتایج متفاوتی را در </span>MIC</p> <p dir="RTL">سیپروفلوکساسین نشان داد. <span dir="LTR">Real-time PCR</span> ، افزایش بیان 3/2 برابری پمپ دفعی <em><span dir="LTR">OqxAB</span></em> و 4 برابری پمپ دفعی <em><span dir="LTR">AcrAB</span></em> در نمونه های مقاوم را آشکار ساخت.</p> <p><strong><span dir="RTL">بحث</span></strong><span dir="RTL">: وجود ژن های مقاومت، افزایش سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک های رایج و افزایش عفونتهای بیمارستانی و مرگ و میر ناشی از آن همه و همه لزوم تشخیص دقیق باکتری های مقاوم و جلوگیری از ایجاد مقاومت های جدید و کنترل گسترش مقاومت ها را ضروری می سازد</span></p> <p dir="rtl" style="text-align: left"><span style="font-family: TimesNewRomanPS-BoldItalicMT; font-size: 11pt; color: rgb(35, 31, 32);"><b>Background: </b><span style="font-family: TimesNewRomanPS-ItalicMT; font-size: 11pt;">The increasing emergence of antimicrobial resistance among gram negative bacteria especially<br> <span style="font-size: 11pt;">Enterobacteriaceae has become a global problem. Klebsiella pneumoniae is an opportunistic pathogen, which<br> <span style="font-size: 11pt;">recently due to causing broad spectrum of disease and antibiotic resistance has been lionized. Efflux pumps are one<br> <span style="font-size: 11pt;">of the antibiotic resistance mechanisms, which were introduced in this bacteria. Therefore, the aims of this study<br> <span style="font-size: 11pt;">were detection of oqxA, oqxB, acrA and acrB genes, evaluation of expression level of oqxA and acrA genes and<br> <span style="font-size: 11pt;">determination of antibiotic resistance patterns among Klebsiella pneumoniae isolated at Tehran hospitals.<br> <span style="font-family: TimesNewRomanPS-BoldItalicMT; font-size: 11pt;"><b>Materials and Methods: </b><span style="font-family: TimesNewRomanPS-ItalicMT; font-size: 11pt;">In this descriptive study 83 Klebsiella pneumoniae were collected from patients attending<br> <span style="font-size: 11pt;">to three hospitals in Tehran. Antibiotic susceptibility test was performed by disk diffusion method. The presence of<br> <span style="font-size: 11pt;">oqxA, oqxB, acrA and acrB resistance genes was detected by PCR. The CCCP was used as efflux pump inhibitor and<br> <span style="font-size: 11pt;">the oqxA, acrA genes expression level was analyzed by using real-time PCR.<br> <span style="font-family: TimesNewRomanPS-BoldItalicMT; font-size: 11pt;"><b>Results: </b><span style="font-family: TimesNewRomanPS-ItalicMT; font-size: 11pt;">The most of strains showed to have OqxAB (96%) and AcrAB (97%) pumps. The use of efflux pump inhibitor<br> <span style="font-size: 11pt;">showed different results for ciprofloxacin MIC. Real-time PCR assay showed higher expression level of OqxAB (2.3<br> <span style="font-size: 11pt;">folds) and AcrAB (4 folds) pumps in resistant strains.<br> <span style="font-family: TimesNewRomanPS-BoldItalicMT; font-size: 11pt;"><b>Conclusion: </b><span style="font-family: TimesNewRomanPS-ItalicMT; font-size: 11pt;">The existence of antibiotic resistance genes, increasing of Klebsiella pneumoniae strains, which become<br> <span style="font-size: 11pt;">resistant to common antibiotics and nosocomial infections, highlights the need for particular detection, prevention<br> <span style="font-size: 11pt;">and control of spread of resistant bacteria.</span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></p> کلبسیلا پنومونیه- پمپ های ترشحی- مقاومت آنتی بیوتیکی- Real-Time PCR : klebsiella Pneumeniae, Efflux Pumps, Antimicbial resistance, Real-Time PCR. 42 48 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2392-1&slc_lang=fa&sid=1 آرزو سعادتیان فریور arezoosf28@yahoo.com 100319475328460029381 100319475328460029381 Yes دانشگاه آزاد اسلامی جمیله نوروزی arezoosf28@yahoo.com 100319475328460029382 100319475328460029382 No دانشگاه آزاد اسلامی گیتا اسلامی arezoosf28@yahoo.com 100319475328460029383 100319475328460029383 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی آذر سبکبار arezoosf28@yahoo.com 100319475328460029384 100319475328460029384 No دانشگاه آزاد اسلامی علی هاشمی arezoosf28@yahoo.com 100319475328460029385 100319475328460029385 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی