fa بررسی بیان ژن های موثر در سنتز گاما گلوبین قبل و بعد از تمایز سلول های بنیادی خونساز به رده سلول های اریتروئیدی پژوهشی Original <p dir="RTL"><strong>زمینه و هدف:</strong> القا هموگلوبین جنینی (<span dir="LTR">Hb-F</span>) در بیماران مبتلا به هموگلوبینوپاتی علائم بیماری را بهبود می بخشد. عوامل متعددی می</p> <p dir="RTL"><strong>سابقه و هدف</strong><strong>:</strong> القا هموگلوبین جنینی در بیماران مبتلا به هموگلوبینوپاتی علائم بیماری را بهبود می بخشد. عوامل متعددی می توانند بیان ژن گاما گلوبین را القاء نموده و سبب افزایش میزان هموگلوبین جنینی در بیماران شوند. از آنجایی که امروزه یکی از بهترین رویکردهای درمانی برای بیماران هموگلوبینوپاتی افزایش هموگلوبین جنینی است؛ در این مطالعه بیان ژن های دخیل در تنظیم سنتز گاما گلوبین نظیر<span dir="LTR">PIPKII-alpha</span> ، <span dir="LTR">BCL11a</span> و <span dir="LTR">miR-30a</span> در تمایز سلول های بنیادی خونساز <span dir="LTR">CD34</span>^{<span dir="LTR">+</span>} به رده اریتروئیدی بررسی شد.&nbsp;</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش ها:</strong> این مطالعه از نوع تجربی بود. در این مطالعه از سلول های <span dir="LTR">CD34</span>^{<span dir="LTR">+</span>} جدا شده از خون بندناف نوزادان سالم استفاده شد. سلول های <span dir="LTR">CD34</span>^{<span dir="LTR">+</span>} در محیط کشت تمایزی کشت داده شد. کلونی های اریتروئیدی در روزهای 11،8و 14 جداسازی شدند و پس از تایید، بیان ژن های گاما گلوبین، <span dir="LTR">PIPKII-alpha</span>، <span dir="LTR">BCL11a</span> و <span dir="LTR">miR-30a</span> با استفاده از تکنیک کمی <span dir="LTR">Real-Time PCR</span> ارزیابی شده و با استفاده از فرمول آماری <span dir="LTR">t-test</span> مورد آنالیز قرار گرفتند.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته ها</strong><strong>:</strong> نتایج به دست آمده در این مطالعه نشان داد که در روزهای 11،8و 14 بعد از تمایز، بیان کمی ژن گاما گلوبین به تدریج در روز هشتم شروع شده و در روز 14تمایز به اوج خود می رسد. به موازات افزایش22 برابری بیان گاماگلوبین، ژن <span dir="LTR">PIPKII-alpha</span> نیز روند افزایش 5/2 برابری از خود نشان داد؛ در حالیکه بیان ژن <span dir="LTR">BCL11a</span> در طی تمایز، روند کاهشی تا حد 2/1 برابر داشت. علاوه بر این، بیان <span dir="LTR">miR-30a</span> در طی تمایز به سمت رده اریتروئیدی با افزایش 3/2 برابری همراه بود (<span dir="LTR">P <0.05</span>).</p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه گیری</strong><strong>:</strong> نتایج به دست آمده حاکی از افزایش بیان ژن <span dir="LTR">PIPKII-alpha</span> و کاهش بیان <span dir="LTR">BCL11a</span> در روند تمایز اریتروئیدی سلول های<span dir="LTR">CD34</span>^{<span dir="LTR">+</span>} می باشد. با توجه به الگوی بیان <span dir="LTR">miR-30a</span> و ژن های هدف آن یعنی <span dir="LTR">PIPKII-alpha</span> و <span dir="LTR">BCL11a</span> نمی توان اثر مهاری این <span dir="LTR">microRNA</span> را بر روی <span dir="LTR">PIPKII-alpha</span> مطرح کرد ولی به علت اثر مهاری آن بر روی ژن <span dir="LTR">BCL11a</span> می توان این <span dir="LTR">microRNA</span> به عنوان یکی از مولکول های تنظیمی مسیر القا هموگلوبین <span dir="LTR">F</span> معرفی کرد. اگرچه مطالعات بیشتری برای بررسی این ارتباط مورد نیاز می باشد.</p> <p><strong>Background and aim:</strong> Induction of fetal hemoglobin (Hb-F) can improve the patients&rsquo; symptoms of haemoglobinopathies. Several factors can induce gamma globin gene expression and increased Hb-F levels in patients. In this study, the expression of genes is involved in regulation of gamma globin synthesis such as PIPKII-alpha BCL11a, and miR-30a during CD34⁺ hematopoietic stem cell differentiation into erythroid lineage was studied.</p> <p><strong>Material and Methods</strong>: In this study, CD34⁺ cells were isolated from umbilical cord blood. Then, CD34⁺ cells were cultured in differentiation medium. Erythroid colonies were harvested on days 8, 11, 14 and gene expression of gamma globin, PIPKII-alpha, BCL11a, and miR-30a were analyzed by quantitative RT- PCR.</p> <p><strong>Results</strong>: The results showed that gene expression of gamma-globin gradually at the 8^th day after differentiation started and at 14^th day reached to the highest level of its expression. In parallel with increasing the expression of gamma-globin, the expression of PIPKII-alpha increased, while the expression of BCL11a decreased. Moreover, the expression of miR- 30a increased during differentiation into erythroid lineage.</p> <p><strong>Conclusion</strong>: The results indicated that increased expression of PIPKII-alpha and decreased expression of BCL11a during CD34⁺cells differentiation to erythroid lineage. According to expression pattern of miR-30a and its target genes, PIPKII-alpha and BCL11a, we cannot suppose the inhibitory effect of miR-30a on PIPKII-alpha expression, but due to inhibitory effect of miR-30a on BCL11a gene, we can introduce this microRNA as a regulatory molecule in the induction of Hb-F pathway. However, the further studies are needed to investigate this interaction.</p> هموگلوبینوپاتی, گاماگلوبین, PIPKII-alpha, BCL11a, miR-30a Hemoglobinopathy, Gamma globin, PIPKII-alpha, BCL11a, miR-30a 125 130 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2458-2&slc_lang=fa&sid=1 Zahra Shamsi زهرا شمسی zahrashams1@yahoo.com 100319475328460029483 100319475328460029483 No دانشگاه تربیت مدرس Amir Atashi امیر آتشی atashia@modares.ac.ir 100319475328460029484 100319475328460029484 Yes دانشگاه تربیت مدرس Saied Abroun سعید آبرون abroun@modares.ac.ir 100319475328460029485 100319475328460029485 No دانشگاه تربیت مدرس kaveh Tari کاوه طاری tari@modares.ac.ir 100319475328460029486 100319475328460029486 No دانشگاه تربیت مدرس Mahshid AkhavanRahnama مهشید اخوان رهنما mahshidakhavan69@yahoo.com 100319475328460029487 100319475328460029487 No دانشگاه تربیت مدرس Azadeh Anbarlou آزاده انبارلو anbarlou1990@gmail.com 100319475328460029488 100319475328460029488 No دانشگاه تربیت مدرس Masoud Soleimani مسعود سلیمانی soleim_m@modares.ac.ir 100319475328460029489 100319475328460029489 No دانشگاه تربیت مدرس Saeid Kaviani سعید کاویانی kavianis@modares.ac.ir 100319475328460029490 100319475328460029490 No دانشگاه تربیت مدرس