fa بررسی اثر تزریق داخل صفاقی نانوذره کیتوزان همراه شده با آنتی‌ژن های ترشحی-تراوشی لیشمانیا ماژور برعملکرد ماکروفاژها در مواجهه با انگل در موشهای BALB/c ایمنی‌شناسی Immunology پژوهشی Original <p dir="RTL" style="margin: 0px; line-height: 29pt; text-indent: 0in;"><i><b><span b="" lang="AR-SA" style="margin: 0px; color: black; font-family: ">چکیده</span></b><b><span b="" lang="AR-SA" style="margin: 0px; font-family: "><font color="#000000">:</font></span></b></i></p> <p dir="RTL" style="margin: 0px; line-height: normal; text-indent: 0in;"><br> &nbsp;</p> <p dir="RTL" style="margin: 0px; line-height: normal; text-indent: 0in;">سابقه وهدف: لیشمانیا ماژور عامل بیماری لیشمانیوز است. این بیماری در حال حاضر به یک مشکل بهداشت عمومی تبدیل شده است. تعدیل پاسخ های<br> سیستم ایمنی به نحوی که بتواند عفونت یا تکثیر انگل را مهار کند، یک راه موثر در غلبه بر لیشمانیوز خواهد بود. آنتی ژن های ترشحی- تراوشی انگل لیشمانیا، نقش<br> تعدیل کنندگی سیستم ایمنی را بر عهده دارند، از این رو در طراحی واکسن و روش های ایمونوتراپی به کار گرفته می شوند. به نانوذرات با توجه به ویژگی هایی که<br> در تحریک سیستم ایمنی دارند، در سال های اخیرمورد توجه قرار گرفته اند. هدف از این تحقیق، تولید ترکیبی از نانوذرات و آنت یژن های ترشحی-تراوشی است که<br> بتواند پاسخ ایمنی را القا کند.<br> مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی که روی ماکروفاژهای صفاقی موش انجام شده است، آنتی ژن های ترشحی- تراوشی انگل لیشمانیا ماژور از سوپرناتانت<br> کشت انگل با استفاده از اولتراسانتریفیوژ جدا شده و محدوده وزن مولکولی پروتئینی و مقدار آن به روش SDS-PAGE و برادفورد تعیین شد. سپس این آنتی ژن ها<br> با نانوذره کیتوزان همراه شدند و صحت آن با FTIR تایید شد. برای بررسی خاصیت کشندگی نانوذره بر ماکروفاژها، تست MTT انجام شد. پنج گروه موش ماده<br> BALB/c در روزهای 10،21 ، 0 به صورت داخل صفاقی با نانوذره و نانوذره همراه با پروتئین حساس شدند. ماکروفاژها در روز ۲۸ از موش ها جدا شده و به مدت یک<br> ساعت با انگل مجاور شدند. بعد از ۷۲ ساعت انکوباسیون، میزان تولید NO و مهار رشد انگل در پاسخ به لیشمانیا بررسی و با تست آماری One-WayANOVA<br> آنالیز شد.<br> نتایج: در بررسی انجام شده، آنتی ژن های ترشحی- تراوشی انگل لیشمانیا ماژور در محدوده وزنی 75 - 110 کیلو دالتون قرار داشتند و با راندمان 76 درصد با نانوذرات<br> کیتوزان همراه شدند. نتایج به دست آمده نشان داد که آنتی ژن های ترشحی- تراوشی انگل لیشمانیا ماژور به تنهایی سبب افزایش معنا دار تولید نیتریک اکساید در<br> ماکروفاژها می شود و حضور کیتوزان این افزایش را تقویت می کند( P<0.01 ). همچنین گروهی که آنت یژن های ترشحی- تراوشی انگل لیشمانیا ماژور همراه شده با<br> کیتوزان را دریافت کرد هاند، ک مترین میزان تکثیر انگل را نشان دادند( .(P<0.05<br> نتیج هگیری: آنتی ژن های ترشحی-تراوشی لیشمانیا ماژور اگر با نانوذره کیتوزان همراه شوند، می توانند از راه افزایش تولید نیتریک اکساید، عملکرد کشندگی<br> ماکروفاژ را افزایش دهند. از این رو می توانند به عنوان کاندیدایی برای تولید واکسن و بهبود بیماری مطرح شوند.<br> <br> <br> <span lang="RU" style="margin: 0px; color: red; font-size: 14pt;" dir="LTR"></span></p> <p style="margin: 0px; text-align: justify; text-indent: 0in; unicode-bidi: embed; direction: ltr; text-justify: kashida; text-kashida: 0%;">Background: Leishmania major (L.major) is a causative agent of leishmaniasis. The disease has now become<br> a public health problem. Modulation of the immune responses to inhibit the infection or the proliferation<br> of the parasite is an effective way to overcome the leishmaniosis. Leishmania parasite secretory-excretory<br> antigens are responsible for immune system modulation; therefore, they are used in vaccine design and<br> immunotherapy. Nanoparticles have been considered in recent years due to the features that stimulate<br> the immune system. The purpose of the present study was to produce a combination of nanoparticles and<br> secretory-excretory antigens to induce immune responses.<br> Materials and methods: L.major secretory-excretory antigens were isolated from supernatant of parasite<br> culture using ultracentrifugation and protein molecular weight and concentration were determined using<br> SDS-PAGE and Bradford methods. The chitosan nanoparticle were loaded with antigens which confirmed<br> by FTIR. MTT test was performed to determine the cytotoxic effect of nanoparticles on macrophages. Five<br> groups of female BALB/c mice were sensitized with nanoparticles and nanoparticles loaded with the protein<br> on days 0.10 and 21. The macrophages were isolated from the mice and infected with L.major for one hour.<br> After 72 hours of incubation, NO production and inhibition of parasite growth were measured in response<br> to L.major.<br> Result: In the present study, the excretory-secretory antigens of the L.major were in the range of 75-110<br> kDa, and loaded with chitosan nanoparticle by %76 efficacy. The results showed that the excretory-secretory<br> antigens of the L.major parasites significantly increased the production of nitric oxide in the macrophages<br> and the presence of chitosan induced this increase (P<0.01). In addition, the group that received chitosan<br> loaded with the excretory secretory antigens of the L.major showed the least proliferation of the parasites<br> (P<0.05).<br> Conclusion: If chitosan nanoparticles loaded with L.major excretory-secretory antigens can increase<br> the activity of macrophage killing function by increasing nitric oxide production; therefore, they can be<br> nominated as candidates for vaccine development and disease improvement.</p> آنتی‌ژن های ترشحی - تراوشی , کیتوزان, لیشمانیا ماژور, ماکروفاژ excretory secretory antigens , chitosan, Leishmania major, macrophage 97 104 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1636-2&slc_lang=fa&sid=1 Elham Feizabadi الهام فیض ابادی elham.feizabadi23@gmail.com 100319475328460028726 100319475328460028726 No Tarbiat Modares تربیت مدرس Ahmad Zavaran Hosseini احمد زواران حسینی zavarana@modares.ac.ir 100319475328460028727 100319475328460028727 No Tarbiat Modares تربیت مدرس Sara Soudi سارا صعودی soudi@modares.ac.ir 100319475328460028728 100319475328460028728 Yes Tarbiat Modares تربیت مدرس