fa بررسی اثر دگزامتازون روی تغییرات بیان رونوشت ژن های Fas/FasL و Bax/Bcl2 در رده سلولی HT-29 سرطان کولورکتال انسانی ژنتیک Genetic پژوهشی Original <div><span style="color:#0070C0;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:16.0pt;">چکیده:</span></span></span><br> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:16.0pt;">سابقه و هدف: سرطان کولورکتال یکی از شای عترین سرطان ها و عامل مرگ بر اثر سرطان در جهان است. دگزامتازون، یک داروی گلوکوکورتیکوئیدی و دارای&nbsp;خواص ضد تکثیری و ضد التهابی است که قادر به مهار رشد و القا آپوپتوز در رده های سلولی سرطان میلوما انسانی است. هدف از این تحقیق تعیین اثر این دارو روی رده سلولی HT-29 سرطان کولورکتال انسانی با تکیه بر روی بیان ژن های مسیر خارجی آپوپتوزی ) Fas و FasL ( و بیان ژن های مسیر داخلی آپوپتوزی Bax&nbsp;و Bcl-2 است.<br> مواد و روش ها: تحقیق به روش تجربی انجام شد. پس از کشت رده سلولی HT-29 ، سلول ها تحت تیمار با غلظت های مختلف دگزامتازون ) 1/ 0 میکرومول الی&nbsp;1000 میکرومول( و زمان های مختلف ) 24 ، 48 و 72 ساعت( قرار گرفتند. بررسی سمیت با تست MTT ارزیابی و IC50 تعیین شد. برای بررسی کمی تغییر بیان&nbsp;رونوشت ژ نهای Fas/FasL و RNA ،Bax/Bcl-2 ، از سلول های تیمار شده و تیمار نشده استخراج شد و پس از سنتز cDNA ، بیان رونوشت ژن ها توسط quantitative&nbsp;Real time-PCR ارزیابی و آنالیز داده ها با استفاده از روش لیواک سنجیده شد.<br> یافته ها: دگزامتازون در غلظت 1000 میکرومول به کاهش سلول های زنده در هر سه بازه زمانی 24 ، 48 و 72 ساعت منجرشده است، اما این غلظت بعد از 48&nbsp;ساعت انکوباسیون به عنوان IC50 تعیین شد. پس از تیمار سلول ها در غلظت IC50 ، سطح بیان رونوشت ژ نهای Fas و FasL در مقایسه با سلول های تیمار نشده&nbsp;تغییر معنا دار مشاهده نشد( p <0.05 ). در حالی که سطح بیان رونوشت ژ نهای Bax و Bcl-2 به طور معنا دار در مقایسه با سلول های تیمار نشده به ترتیب افزایش و&nbsp;کاهش یافت( p <0.05 ). دگزامتازون به روش وابسته به دوز و زمان روی رده سلولی HT-29 سرطان کولورکتال انسانی اعمال اثر کرده است.<br> نتیجه گیری: دگزامتازون می تواند سبب مهار رشد در رده سلولی HT-29 سرطان کولورکتال انسانی و همچنین به القا آپوپتوز از طریق مسیر داخلی منجر شود، درحالی که تاثیری روی القا آپوپتوز از طریق مسیر خارجی ندارد. بنابراین تیمار رده سلولی HT-29 سرطان کولورکتال انسانی با غلظت معینی از دگزامتازون میتواند&nbsp;بیان ژن های دخیل در مسیر داخلی آپوپتوز را در راستای مرگ برنامه ریزی سلول تغییر دهد.</span></span></div> <div> <hr align="left" size="1" width="33%" > <div><div id="_com_1" uage="JavaScript"></div></div> </div> <u><span dir="LTR"></span></u> <strong>Background:&nbsp;</strong>Colorectal cancer is one of the most common cancers and among the most common causes of cancer death worldwide. Dexamethasone is a glucocorticoid medication which has anti-proliferative and anti-inflammatory properties that induce apoptosis and growth inhibition in human myeloma cell lines&nbsp;<em>in vitro</em>. The aim of the current study was to determine the effects of dexamethasone against human colorectal cancer HT-29 cell lines, relying on the expression of genes which are involved in extrinsic (<em>Fas</em>&nbsp;and&nbsp;<em>Fasl</em>) and intrinsic pathway of apoptosis (<em>Bax</em>&nbsp;and&nbsp;<em>Bcl2</em>).<br> <br> <strong>Materials and methods:</strong> An experimental study was conducted<strong>. &nbsp;</strong>HT-29 cell line was cultured and then treated with various concentrations of dexamethasone (from 0.1 to 1000 &micro;M) for 24h, 48h, and 72h incubation. The cytotoxicity was measured using MTT assay and IC50&nbsp;was determined. Then, RNA was extracted from treated and untreated cells and cDNA was synthesized. Gene expression was investigated using qReal-Time PCR method. Data analysis was performed using the&nbsp;livak&nbsp;method.<br> &nbsp;<br> <strong>Results:</strong>&nbsp; Dexamethasone at 1000&micro;M significantly inhibited the growth of treated HT-29 cells after 24h, 48h, and 72h incubation and IC50&nbsp;was&nbsp;1000&mu;M after 48h. After treating cells at IC50&nbsp;concentration, the mRNA expression of&nbsp;<em>Fas</em>&nbsp;and&nbsp;<em>FasL</em>&nbsp;did not change significantly in comparison with untreated cells (p <0.05), while&nbsp;<em>Bax</em>&nbsp;and&nbsp;<em>Bcl-2</em>&nbsp;mRNA expression increased and decreased respectively in comparison with untreated cells (p <0.05). Dexamethasone was effective against human colorectal cancer HT-29 cell line in a dose -dependent manner and induced the intrinsic genes of apoptosis.<br> <br> <strong>Conclusion:</strong>&nbsp; Dexamethasone can inhibit the growth of human colon cancer HT-29 cell lines and induces apoptosis through the intrinsic pathway of apoptosis, while it has no effect on the extrinsic pathway of apoptosis.<br> &nbsp; سرطان کولورکتال, آپوپتوز, دگزامتازون, رده سلولی HT-29 Colorectal cancer, Apoptosis, Dexamethasone, HT-29 cell line 352 359 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3635-2&slc_lang=fa&sid=1 Pantea Hajimirza Shafiesoltani پانته آ حاجی میرزا شفیع سلطانی panteahajimirza70@gmail.com 100319475328460028469 100319475328460028469 No Department of Genetics, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه ژنتیک، دانشکده علوم و فناوری های نوین، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Flora Forouzesh فلورا فروزش f8forouzesh@gmail.com 100319475328460028470 100319475328460028470 Yes Department of Genetics, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه ژنتیک، دانشکده علوم و فناوری های نوین، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Mahdi Shabani مهدی شعبانی Department of Immunology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran 100319475328460028471 100319475328460028471 No Department of Immunology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران