fa بررسی عملکرد برون تنی ریزبافت های کبدی تولید شده با روش هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی، اندوتلیالی و رده کبدی علوم سلولی( سلولی مولکولی، سلول های بنیادی) Cellular Sciences (Molecular Cells, Stem Cells) پژوهشی Original <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:12px;"><span style="font-family:Tahoma;">سابقه و هدف: امروزه نیاز روزافزونی به مدل های آزمایشگاهی کبد برای بررسی مکانیسم بیمار یهای انسان، اثربخشی داروهای جدید و سم شناسی وجود دارد.مطالعه های پیشین نشان داد ه اند که هم کشتی هپاتوسیت ها با سلو لهای غیرپارانشیمی و حضور ماتریکس برون سلولی، به ویژه در شرایط کشت سه بعدی، میتواند&nbsp;سبب بهبود عملکرد هپاتوسیت ها شود. بنابراین هدف این مطالعه، ایجاد یک روش تکرارپذیر و مقرو ن به صرفه برای تولید انبوه ریزبافت های کبدی در شرایط آزمایشگاهی بود.<br> مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، ریزبافت های کبدی )با قطر 500 میکرومتر( با هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی انسان، سلو لهای اندوتلیالی ورید&nbsp;بندناف انسان و سلول های رده کبدی Huh-7 ، در یک بستر هیدروژلیِ حاصل از ماتریکس برو ن سلولی کبد و آلژینات، تولید شدند. سپس زنده مانی سلو لها، قابلیت&nbsp;ذخیره گلیکوژن و فعالیت آنزیم سیتوکروم P450 آن ها در روز 28 ارزیابی شد. بیان ژن های اختصاصی کبدی( ALB, SULT1A1 ) در روز های 1 و 14 و میزان ترشح&nbsp;آلبومین و اوره در روزهای 1، 7، 14 ، 21 و 28 بررسی شد. علاوه برآن، حساسیت ریزبافت ها به سمّیت حاد دارویی ناشی از متفورمین و دیکلوفناک و همچنین اتانول&nbsp;ارزیابی شد. کشت دوبعدی سلو لهای Huh-7 نیز به عنوان گروه کنترل لحاظ شد.<br> یافته ها: اکثر سلو لهای ریزبافت ها تا روز 28 زنده بوده و ضمن ذخیره سازی گلیکوژن، قابلیت القاء پذیری سیتوکروم را تا هفت برابر فعالیت پایه داشتند. بیان&nbsp;ژ نهای ALB و SULT1A1 در ریزبافت ها، در روز 14 نسبت به گروه کنترل افزایش معن اداری ( p<0.05 ) یافته بود. ترشح آلبومین و اوره نیز در همه زمان های&nbsp;نمونه برداری، در ریزبافت های کبدی به طور معنا داری ( p<0.05 ) بالاتر از گروه کنترل بود. علاوه برآن، ریزبافت های کبدی نسبت به گروه کنترل، به سمّیت دارویی&nbsp;و الکل )در برخی غلظت ها( حساسیت بیشتری ( p<0.05 ) را نشان می دادند.<br> نتیجه گیری: به نظر می رسد ریزبافت های کبدی حاصله می توانند به عنوان مدل آزمایشگاهی مناسب و دارای عملکرد برای کبد درنظر گرفته شود.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background and Aim: </strong>There is an urgent need for reliable <em>in vitro</em> liver models to assess the mechanisms of human diseases, and impact of newly developed drugs or toxins. Previously showed that co-culture of hepatocytes with non-parenchymal cells and presence of extracellular matrix (ECM) improve the <em>in vitro</em> functionality of hepatocytes. Aim of this study was to develop a reproducible method for scalable generation of liver microtissues.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this experimental study, liver microtissues with 500um diameter generated through co-culturing of Huh-7, human mesenchymal stem cells and human umbilical vein endothelial cells in a composite hydrogel of liver-ECM and alginate. Cell viability, capability for glycogen storage and cytochrome P450 enzyme activity were evaluated on day 28. Hepatic-specific genes (<em>ALB</em> and <em>SULT1A1</em>) on days 1 and 14, and albumin and urea secretion on days 1, 7, 14, 21 and 28 were assessed. Furthermore, the microtissue sensitivity to acute toxicity of Metformin, Diclofenac and ethanol were investigated. Two-dimensional cultured Huh-7 was considered as control group.<br> <strong>Results: </strong>Most cells in the microtissues were alive up to day 28, accumulated glycogen and have cytochrome inducibility 7-fold more than the basic activity. In comparison to control, <em>ALB</em> and <em>SULT1A1</em> genes upregulated (p<0.05) on day 14, also albumin and urea secretion increased (p<0.05), in all sampling time, in microtissues. Furthermore, microtissues have more sensitivity (p<0.05) to some concentrations of the drugs and ethanol, compared to control.<br> <strong>Conclusion: </strong>It seems that the liver microtissues may considered as an appropriate and functional <em>in vitro</em> model for liver.<br> &nbsp;</div> مدل برون تنی کبد, سمّیت دارویی, ماتریکس برون سلولی, مهندسی بافت, سلول بنیادی مزانشیمی In vitro liver model, drug toxicity, extracellular matrix, Tissue engineering, mesenchymal stem cells 532 539 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1561-2&slc_lang=fa&sid=1 Sara Derakhshan سارا درخشان 100319475328460028582 100319475328460028582 No Department of Stem Cells and Developmental Biology, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه سلول های بنیادی و زیست شناسی تکوینی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Ali Bidmeshki pour علی بیدمشکی پور 100319475328460028583 100319475328460028583 No Department of Biology, Faculty of Science, Razi University, Kermanshah, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران Reza Kowsari-Esfahan رضا کوثری اصفهان 100319475328460028584 100319475328460028584 No Department of Cell Engineering, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه مهندسی سلول، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Masoud Vosough مسعود وثوق 100319475328460028585 100319475328460028585 No Department of Stem Cells and Developmental Biology, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه سلول های بنیادی و زیست شناسی تکوینی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Leila Montazeri لیلا منتظری 100319475328460028586 100319475328460028586 No Department of Cell Engineering, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه مهندسی سلول، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Mohammad Hossein Ghanian محمد حسین قانیان 100319475328460028587 100319475328460028587 No Department of Cell Engineering, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه مهندسی سلول، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Mohamad Amin Hajari محمد امین هاجری 100319475328460028588 100319475328460028588 No Department of Cell Engineering, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه مهندسی سلول، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Mohamad Ajoudanian محمد آجودانیان 100319475328460028589 100319475328460028589 No Department of Tissue Engineering and Applied Cell Sciences, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran - Vista Cell Farmed Co., Tehran, Iran گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکد ه فناوری های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران - شرکت ویستاسل فارمد، تهران، ایران Abbas Piryaei عباس پیریایی piryae@sbmu.ac.ir 100319475328460028590 100319475328460028590 Yes Department of Tissue Engineering and Applied Cell Sciences, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran*Department of Biology and Anatomical Sciences, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکد ه فناوری های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران--- گروه بیولوژی و علوم تشریحی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران