Pejouhesh dar Pezeshki (Research in Medicine)

fa بررسی اثر آنالوگ کورکومین بر تجمع چربی و بیان ژن‌های SIRT1 و FASدر سلول‌های HepG2 Evaluation of the Effect of Curcumin Analog on Lipid Accumulation and SIRT1 and FAS Genes Expression in HepG2 Cells بیوشیمی Biochemistry پژوهشی Original <div style="text-align: justify;">سابقه و هدف: کبد چرب غیر الکلی بیماری است که در صورت درمان نشدن به سیروز کبد منجر خواهد شد. کورکومین ماده مؤثره ریزوم گیاه زردچوبه است که دارای خواص آنتی‌اکسیدانی ضد التهابی ضد میکروبی و ... است. در مطالعه حاضر اثرات <a name="_Hlk111213926">آنالوگ کورکومین (</a>FCur) بر بیان ژن‌های SIRT1 و FAS و تجمع تری‌گلیسیریدها در سلول‌های HepG2 چرب شده (مدل کبد چرب) بررسی شده است. روش کار: در این مطالعه تجربی، پس از کشت سلول‌های  HepG2در محیط و شرایط مناسب، به منظور انتخاب دوز مناسب برای کورکومین و آنالوگ آن از تستMTT  استفاده شد. پس از چرب کردن سلول‌ها و تیمار آن‌ها با ترکیبات مورد نظر RNA استخراج و cDNA ساخته شد. سپس به منظور بررسی اثر کورکومین و آنالوگ آن روی بیان ژن‌های SIRT1 و FAS از Real- Time PCR استفاده شد. فعالیت SIRT1 با استفاده از یک کیت فلوئورومتریک و میزان تری‌گلیسیرید داخل سلولی با استفاده از کیت تشخیص تری‌گلیسیرید نیز اندازهگیری شد و در نهایت به دلیل مقایسه بین بیش از دو گروه با یکدیگر نتایج با روش آماری t- Test وone way Anova  با 05/0p-value <  آنالیز قرار گرفت. یافته‌ها: در اثر تیمار سلول‌های چرب شده HepG2  (مدل کبد چرب) با Cur، بیان نسبی ژن SIRT1 (0/8 ± 1/52) و فعالیت آنزیمی آن ( 0/7 ± 2/1) نسبت به گروه کنترل ( برای بیان ژن: 1/79 ± 0/9 و برای فعالیت آنزیمی: 1/66 ± 0/8) به طور معنا‌داری، افزایش داشته است. در مقابل بیان نسبی ژن FAS (1/69 ± 0/6) نسبت به گروه کنترل (2/03 ± 0/8) و همچنین تری‌گلیسیریدهای تجمع یافته درون این سلول‌ها به طور معناداری کاهش داشته است. همچنین در گروه تیمار شده با F<a name="_Hlk116998052">Cur</a> در مقایسه با گروه کنترل میزان بیان ژن (1/16 ± 2/76)  و فعالیت آنزیمی (1/21 ± 3/2) SIRT1 به طور معنا‌داری افزایش یافته است و میزان بیان ژن FAS (1/1 ± 0/2) در مقایسه با گروه کنترل کاهش معناداری داشته است. فعالیت آنزیمی SIRT1 در گروه FCur نسبت به Cur افزایش بیشتری داشته است، همچنین کاهش بیان ژن FAS در تیمار سلول ها با FCur در مقایسه با Cur به طورقابل ملاحظه‌ای بیشتر بوده است. کاهش چربی داخل سلولی در اثر تیمار با FCur در مقایسه با تیمار با Cur، تا حدودی بیشتر بود. (در تمام ارزیابی‌ها، برای کورکومین 0/01 p-value < و برای مشتق آن 0/001 p-value < است). نتیجه‌گیری: به نظر می‌رسد که آنالوگ کورکومین (FCur) با توجه به دامنه وسیعی از فعالیتهای فارماکولوژیک آن از جمله آثار آن روی متابولیسم لیپید در کبد، می توان به عنوان یک مکمل دارویی در درمان کبد چرب در کنار سایر روش‌های درمانی رایج بهره برد.</div> Background and Aim: Non- alcoholic fatty liver is a disease that will lead to liver cirrhosis if not treated. Curcumin is the active substance of the rhizome of the turmeric plant, which has antioxidant, anti- inflammatory, antimicrobial, etc. properties. In the present study, the effects of curcumin analog on the expression of SIRT1 and FAS genes and the accumulation of triglycerides in fatty HepG2 cells (fatty liver model) have been investigated. Methods: In this experimental study, after cultivating HepG2 cells in the right medium and conditions, the MTT test is used to choose the right dose for curcumin and it’s analog. After oiling the cells and treating them with the desired compounds, RNA was extracted and cDNA was made. Then, in order to investigate the effect of curcumin and its analog on the expression of SIRT1 and FAS genes, Real- Time PCR was used. SIRT1 activity was measured using a fluorometric kit and intracellular triglyceride levels were also measured using a triglyceride detection kit. And finally, the results were analyzed with t- test and one-way Anova statistical methods with p-value < 0.05. Results: As a result of the treatment of HepG2 fatty cells (fatty liver model) with Cur, the relative expression of SIRT1 gene (1.52 ± 0.8) and its enzyme activity (2.1 ± 0.7) increased significantly compared to the control group (for gene ex<illegal tag>pression: 0.9 ± 1.79 and for enzyme activity: 0.8 ± 1.66). On the other hand, the relative expression of the FAS gene (0.6 ± 1.69) compared to the control group (0.8 ± 2.03), as well as the accumulated triglycerides in these cells, and has decreased significantly. Also, in the group treated with FCur compared to the control group, the level of SIRT1 gene expression (2.76 ± 1.16) and enzyme activity (3.2 ± 1.21) increased significantly, and the level of FAS gene expression (0.2 ± 1.1) decreased significantly compared to the control group. The increase in SIRT1 enzyme activity in the FCur group has increased more compared to Cur, and the decrease in FAS gene expression in the treatment of cells with FCur has been significantly higher compared to Cur. The reduction of intracellular lipid was somewhat higher in the treatment with FCur compared to the treatment with Cur. (In all evaluations, p-value < 0.01 for curcumin and p-value < 0.001 for its derivative). Conclusion: It seems that curcumin analog (FCur) can be used as a medicinal supplement in the treatment of fatty liver, along with other common treatment methods, due to its wide range of pharmacological activities, including its effects on lipid metabolism in the liver.   کبد چرب غیر الکلی؛ کورکومین؛ FAS؛ HepG Non- alcoholic fatty liver, curcumin, SIRT1, FAS, HepG 1 11 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4584-1&slc_lang=fa&sid=1 Zahra Tahmasvand زهرا طهماسوند 100319475328460029528 100319475328460029528 No Department of Clinical Biochemistry, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران. Shima Lorestani شیما لرستانی 100319475328460029529 100319475328460029529 No Department of Clinical Biochemistry, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران. Shokoofe Noori شکوفه نوری shnoori85@yahoo.com 100319475328460029530 100319475328460029530 Yes Department of Clinical Biochemistry, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران.