fa مقایسه روش‌های پروتئین‌زدایی در سنجش نیتریک اکساید سرمی به روش گریس پژوهشی Original سابقه و هدف: نیتریک‌اکساید در بسیاری از فرآیندهای فیزیولوژیک و پاتولوژیک نقش دارد. اخیرا توجه زیادی به اندازه‌گیری نیتریک‌اکساید سرمی معطوف شده است. ما در مطالعه قبلی روشی ساده، ارزان و سریع برای اندازه‌گیری نیتریک‌اکساید سرمی را طبق واکنش گریس ارزیابی کردیم. از آنجایی که پروتئین‌زدایی نمونه‌ها برای سنجش نیتریک‌اکساید سرمی با روش گریس ضروری است، در این مطالعه روش‌های مختلف پروتئین‌زدایی سرم برای سنجش نیتریک اکساید سرمی مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: ده روش پروتئین‌زدایی شامل استفاده از متانل، اتانل، سولفات روی، متانل/دی‌اتیل‌اتر، استونیتریل، TCA، PCA، تنگستات سدیم و سولفات آمونیوم و فیلتر 10000 دالتونی، روی 42 نمونه سرم انسانی مورد بررسی قرار گرفت و نتایج سنجش نیتریک‌اکساید در روش‌های مختلف با روش فیلتر به عنوان مرجع مقایسه شد. همچنین میزان نیتریک اکساید در 60 نمونه سرمی تهیه شده از افراد بالغ داوطلب سنجش گردید. یافته‌ها: ضریب همبستگی رسوب‌دهی با متانل، اتانل، سولفات روی، متانل/ دی‌اتیل‌اتر، استونیتریل، TCA، PCA، تنگستات سدیم و سولفات آمونیوم با روش فیلتر به ترتیب 84/0، 92/0، 91/0، 79/0، 88/0، 85/0، 93/0، 53/. و 78/0 با 001/0P< بود. متانل، اتانل و متانل/ دی‌اتیل‌اتر سبب تخمین بیش از حد و TCA، PCA، تنگستات‌سدیم و سولفات‌آمونیوم سبب تخمین کمتر از حد نیتریک‌اکساید سرمی در مقایسه با فیلتر شدند. نتایج سنجش نیتریک اکساید در سرم افراد بالغ دارای توزیع نرمال با میانگین ± خطای معیار 3/1±33 میکرومول در لیتر بود. نتیجه‌گیری: اگر چه در مطالعات مختلف از روش‌های متفاوتی جهت پروتئین‌زدایی نمونه‌های سرمی جهت سنجش نیتریک‌اکساید استفاده می‌شود، طبق نتایج حاصل از این مطالعه به نظر می‌رسد استفاده از سولفات روی بهترین انتخاب باشد. Background: Nitric oxide (NO) is involved in numerous physiologic and phathophysiologic processes. Recently, further investigators have focused on serum NO determination. In our previous study, we validated a simple, cheap and rapid method for serum NO determination based on the Greiss reaction. Deproteinization is a necessary step for this reaction, thus, the present study was designed to assess different deproteinization methods for serum NO determination. Materials and methods: Ten common protein precipitating chemicals including methanol, ethanol, zinc sulfate, methanol/diethyl ether, acetonitrile, TCA, PCA, sodium tangstate, ammonium sulfate and filter were used for deproteinization of 42 human sera, while results were compared to filter separation as a reference. Serum NO levels were determined in 60 sera of adult human. Results: Data showed that correlation coefficient of precipitating agents: methanol, ethanol, zinc sulfate, methanol-diethylether, acetonitrile, TCA, PCA, sodium tangstate, ammonium sulfate against filter separation method were 0.84, 0.92, 0.91, 0.79, 0.88, 0.85, 0.93, 0.53, and 0.78, respectively (p<0.001). Methanol, ethanol and methanol/diethylether caused overestimation, while TCA, PCA, sodium tangstate, and ammonium sulfate caused underestimation of serum NO results. Serum NO level had normal distribution with mean ±SE of 33±1.3 μmol/L. Conclusion: Although different chemical protein precipitants are used for serum NO determination, our study revealed that zinc sulfate is the best choice for this purpose. نیتریک‌اکساید، پروتئین‌زدایی، واکنش گریس، سرم Nitric oxide, Deproteinization, Greiss reaction, Serum 33 37 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-332&slc_lang=fa&sid=1 A Ghasemi اصغر قاسمی Ghasemi@erc.ac.ir 10031947532846003575 10031947532846003575 Yes M Hedayati مهدی هدایتی 10031947532846003576 10031947532846003576 No H Biabani حامد بیابانی 10031947532846003577 10031947532846003577 No A Khoshbaten علی خوش‌باطن 10031947532846003578 10031947532846003578 No AR Asgari علیرضا عسگری 10031947532846003579 10031947532846003579 No