fa کلونینگ cDNA فاکتور VII انعقادی حاصل از رده سلولی هپاتوما پژوهشی Original چکیده سابقه و هدف: فاکتور هفت، پروتئاز انعقادی مسئول شروع آبشار واکنش های پروتئولیتیک است که به تولید ترومبین و در نتیجه تشکیل لخته می انجامد. به دلیل به کارگیری موفق آن در کنترل هموفیلی و نقش احتمالی آن در فرآیندهای مختلف سلولی، فاکتور هفت به عنوان هدف ژن درمانی و سایر مشکلات بالینی مورد توجه قرار گرفته است. در این مطالعه، رده سلولی HepG2 برای کلون فاکتور VII مورد استفاده قرار گرفت. روش بررسی: این تحقیق به روش تجربی انجام گرفت. RNA کل رده سلولی هپاتوما (HepG2) استخراج شد و مورد رونویسی معکوس قرار گرفت و cDNA فاکتور هفت با واکنش PCR تکثیر شد. محصول PCR به وکتور pTZ57R/T منتقل شد ودر باکتری Ecoli ترانسفرم گردید. یافته ها: پس از واکنش PCR، باند DNA مربوط به ژن فاکتورهفت مشاهده شد و بدنبال کلونینگ، پلاسمید نوترکیب بوسیله آنزیمهای محدودگر تایید شد. نتیجه گیری: در این مطالعه، کلونینگ cDNA فاکتور هفت حاصل از لاین سلولی HepG2 گزارش شد که امکان استفاده از آن و دستکاری های بعدی آن فراهم شده است. واژگان کلیدی: فاکتور هفت، هموفیلی، HepG2. Abstract Background: Factor VII, is a coagulant protease it begins the proteolytic cascade reactions and produces thrombin. The use of recombinant human factor VII, (rhFVII) is effective for the treatment of patients with hemophilia A or B. It is a target for gene therapy. This study was done to clone factor VII from HepG2 cell line. Methods: RNA was extracted from the hepatoma, (HepG2), cell line. On reverse transcription FVII cDNA was amplified by RT-PCR. PCR product was cloned into the pTZ57R/T vector and transported into the E-coli cells. Results: By amplification of the FVII gene, the PCR band was observed and cloning into the vector was confirmed by restriction analysis. Conclusion: In this paper we report the cloning of factor VII from HepG2 cell line. Keywords: Cloning, Coagulant VII factor, Hepatoma cell line. واژگان کلیدی: فاکتور هفت، هموفیلی، HepG2. Keywords: Cloning, Coagulant VII factor, Hepatoma cell line. 21 25 http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-500&slc_lang=fa&sid=1 Parisa Shabani1 پریسا شعبانی1، 10031947532846004913 10031947532846004913 No Mojgan Bandehpoor2 مژگان بنده پور2، 10031947532846004914 10031947532846004914 No Salaleh Emamgholipoor1 سلاله امامقلی پور1، 10031947532846004915 10031947532846004915 No Leila Maghen2 لیلا ماغن2، 10031947532846004916 10031947532846004916 No Negar Seyed2 نگار سید2، 10031947532846004917 10031947532846004917 No Bahram Yaghmaie1 بهرام یغمایی1، 10031947532846004918 10031947532846004918 No Bahram Kazemi2 بهرام کاظمی* : bahram_14@yahoo.com 10031947532846004919 10031947532846004919 Yes