سابقه و هدف: سلولهای اپیتلیال پرده آمنیون (hAECs) جمعیت هتروژنی با توانایی تمایز به سه رده سلولی لایه ژرمینال هستند. هدف این مطالعه بهبود روش-های جداسازی و اینمونوفنوتایپینگ سلولهای بنیادی تخلیص شده با استفاده از پنلی از آنتیبادیهای ضد مارکرهای بنیادی بود.
روش بررسی: چهار واحد جفتی از مادرانی که تحت جراحی سزارین انتخابی بوده و هنوز نه ماه بارداری کامل نشده بود تهیه گردید و در شرایط استریل و با حفظ زنجیره سرمایی به آزمایشگاه منتقل شد. پرده آمنیون به صورت مکانیکی از لایه کوریون جدا شده و با استفاده از trypsin- EDTA هضم آنزیمی گردید و سوسپانسیون سلولی به دست آمده جمع آوری شد و پس از چند بار شستشو با استفاده از مارکر اپیتلیالی سایتوکراتین از لحاظ درصد خلوص بررسی گردید. سپس سلولهای به دست آمده از نظر بیان مارکرهای CD29, CD9, CD34, CD45, CD44, CD133, CD73, CD105, CD38, CD10 MHC-I, MHC-II, HLA-G, SSEA-4, STRO و OCT-4 با استفاده از فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفت.
یافتهها: تعداد 80-130 میلیون سلول، بسته به کیفیت و اندازه پرده آمنیون از هر واحد جفتی به دست آمد. بیان 90 درصدی مارکر سایتوکراتین نشان دهنده درصد خلوص بالای این سلولها بود. بررسی فلوسایتومتری سلولها نشان داد این سلولها از نظر بیان مارکرهای CD9, CD10, CD29, CD73, CD105, HLAI, HLA-G, OCT-4, SSEA-4 و STRO مثبت بوده که نشان دهنده بنیادی بودن این سلولها می باشد. این سلولها از نظر بیان مارکرهای CD34, CD38, CD44, CD45, HLA-DR و CD133 منفی بودند. نتیجهگیری: نتایج حاصل از ایمونوفنوتایپینگ نشان داد که سلولهای hAECs مارکرهای زیادی را بیان میکنند که با سلولهای بنیادی جنینی مشترک می باشد و به نظر میرسد که بتوان به عنوان منبع جدیدی از سلولهای بنیادی در کاربردهای درمانی استفاده شود.
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
ایمنیشناسی دریافت: 1392/4/26 | پذیرش: 1392/6/26 | انتشار: 1392/6/26
ارسال پیام به نویسنده مسئول