جلد 46، شماره 2 - ( 4-1401 )
جلد 46 شماره 2 صفحات 29-19 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.TUMS.REC1394.1751
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Ashouri Movassagh S, Ashouri Movassagh S. Effect of 3D substrate obtained from decellularized tissue of rat testis on the differentiation of mouse spermatogonial cells. Research in Medicine 2022; 46 (2) :19-29
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3089-fa.html
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3089-fa.html
آشوری موثق ساناز، آشوری موثق سپیده. اثر بستر سه بعدی حاصل از بافت سلول‌زدایی‌شده بیضه رت بر روی تمایز سلول‌های اسپرماتوگونی موش. پژوهش در پزشکی. 1401; 46 (2) :19-29
جهاد دانشگاهی، مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران، بانک سلول‌های انسانی و جانوری، تهران، ایران. ; گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. ، ashouri_sepideh@yahoo.com
چکیده: (850 مشاهده)
سابقه و هدف: در جنس مذکر، سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی (Spermatogonial stem cells-SSCs) عامل تولید سلول‌های جنسی و باروری هستند و کاهش و آسیب به آن‌ها از عوامل ناباروری است. کشت، تکثیر و تمایز SSCs در محیط آزمایشگاهی می‌تواند راهکاری برای درمان برخی از موارد ناباروی باشد. ما در این مطالعه که در سال 1399 در مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران انجام دادیم، رشد و تمایز SSCs روی بافت بیضه سلول‌زدایی شده (Decellularized testicular matrix-DTM) موش صحرایی را بررسی کردیم.
روش کار: در این مطالعه تجربی، پس از استخراج SSCs با روش آنزیمی از بافت بیضه موش تازه متولدشده این سلول‌ها به مدت سه هفته در محیط کشت اختصاصی تکثیر شدند. سلول‌ها پس از تأیید هویت، برای تمایز در دو گروه یکی بر روی یک لایه ازDTM و دیگری در ظروف کشت معمول کشت داده شدند. پس از گذشت چهار هفته کشت تمایزی بیان ژنهای پیش از میوز (شامل: PLZF و OCT4) و ژنهای میوزی (شامل: SCP3 و Protamine-2) در هر دو گروه با روش Real-time PCR سنجیده شد. برای اطمینان از نتایج حاصل تمام مراحل کار با سه بار تکرار زیستی انجام شد و نتایج حاصل با روش آنالیز واریانس یک طرفه (One way ANOVA) ارزیابی شد.
یافته‌ها: بررسی میزان بیان ژنهای پیش‌میوزی و میوزی پس از چهار هفته کشت تمایزی SSCs روی بستر دو بعدی و DTM با استفاده از Real-time PCR نشان داد که میزان بیان ژنهای میوزی روی بستر DTM به میزان معنا‌داری افزایش یافته است (P ≤ 0.01).
نتیجه‌گیری: در شرایط کشت سه بعدی حاصل از DTM به دلیل ارتباط بهتر سلول‌ها و وجود ماتریکس خارج سلولی طبیعی، شرایط مناسب‌تری برای حفظ، تکثیر و تمایز SSCs نسبت به کشت دو بعدی ایجاد شده است.
روش کار: در این مطالعه تجربی، پس از استخراج SSCs با روش آنزیمی از بافت بیضه موش تازه متولدشده این سلول‌ها به مدت سه هفته در محیط کشت اختصاصی تکثیر شدند. سلول‌ها پس از تأیید هویت، برای تمایز در دو گروه یکی بر روی یک لایه ازDTM و دیگری در ظروف کشت معمول کشت داده شدند. پس از گذشت چهار هفته کشت تمایزی بیان ژنهای پیش از میوز (شامل: PLZF و OCT4) و ژنهای میوزی (شامل: SCP3 و Protamine-2) در هر دو گروه با روش Real-time PCR سنجیده شد. برای اطمینان از نتایج حاصل تمام مراحل کار با سه بار تکرار زیستی انجام شد و نتایج حاصل با روش آنالیز واریانس یک طرفه (One way ANOVA) ارزیابی شد.
یافته‌ها: بررسی میزان بیان ژنهای پیش‌میوزی و میوزی پس از چهار هفته کشت تمایزی SSCs روی بستر دو بعدی و DTM با استفاده از Real-time PCR نشان داد که میزان بیان ژنهای میوزی روی بستر DTM به میزان معنا‌داری افزایش یافته است (P ≤ 0.01).
نتیجه‌گیری: در شرایط کشت سه بعدی حاصل از DTM به دلیل ارتباط بهتر سلول‌ها و وجود ماتریکس خارج سلولی طبیعی، شرایط مناسب‌تری برای حفظ، تکثیر و تمایز SSCs نسبت به کشت دو بعدی ایجاد شده است.
نوع مطالعه: پژوهشی |
موضوع مقاله:
علوم تشریحی (آناتومی، بافت شناسی، جنین شناسی، بیولوژی تولید مثل)
دریافت: 1400/6/22 | پذیرش: 1400/10/4 | انتشار: 1401/5/27
دریافت: 1400/6/22 | پذیرش: 1400/10/4 | انتشار: 1401/5/27
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
This Journal is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License | Research in Medicine
Designed & Developed by : Yektaweb