جلد 48، شماره 4 - ( 12-1403 )
جلد 48 شماره 4 صفحات 25-14 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.RAZI.REC.1400.051
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Najafi F, Rahimi-Feyli P, Moghaddam A, Mohammadi T. The Effect of L-Arginine on Growth of Frozen- Thawed Caprine Spermatogonial Stem Cells in Short- Term Culture. Research in Medicine 2025; 48 (4) :14-25
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3380-fa.html
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3380-fa.html
نجفی فاطمه، رحیمی فیلی پیمان، مقدم علی اصغر، محمدی طیبه. ارزیابی آثار غلظتهای مختلف ال- آرژنین بر القای کلونیزایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی منجمد- ذوبشده بز در کشت کوتاه‌مدت. پژوهش در پزشکی. 1403; 48 (4) :14-25
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران. ، drp.rahimi@gmail.com
چکیده: (436 مشاهده)
سابقه و هدف: با توجه به اهمیت توسعه روشهای کشت و انجماد سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی به عنوان اساس مطالعه‌های ژنتیکی، طب بازساختی، طراحی حیوانات تراریخته و داروهای نوترکیب، تلاش برای ایجاد یک سیستم کشت مناسب اهمیت فراوانی دارد. هدف از انجام مطالعه حاضر، ارزیابی آثار غلظتهای مختلف اسیدآمینه ال- آرژنین بر تکثیر اسپرماتوگونیهای منجمد- ذوب شده بز در شرایط آزمایشگاه است.
روش کار: مطالعه حاضر تجربی است و پنج بار تکرار انجام شد. سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از روش هضم آنزیمی دو مرحلهای از بیضههای بزغالههای نابالغ استخراج و با حذف تمایزی تخلیص شد. پس از انجماد- یخ‌گشایی در یک دوره کشت 10 روزه در شش گروه آزمایشی شامل گروه شاهد (کشت سلولها در محیط پایه DMEM حاوی 1 درصد آنتی‌بیوتیک و 5 درصد سرم جنینی گاو) و تیمارهای 2، 3، 4، 5 و 6 به ترتیب شامل محیط پایه به اضافه غلظتهای 50، 100، 200، 500 و 1000 میکرومول بر لیتر ال- آرژنین، کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونیهای تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 بررسی شد. داده‌ها با آزمون آنالیز واریانس یک‌طرفه و آزمون تکمیلی توکی در سطح 5 درصد با نرم‌افزار آماریMinitab 16 آنالیز شدند. برای شناسایی سلولهای اسپرماتوگونی از آزمون RT- PCR نشانگرهای ID4، BCL6، PGP9.5، PLZF، VASA و OCT-4 استفاده شد.
یافته‌ها: درصد حیات سلولها پس از جداسازی و افزودن محلول انجماد به ترتیب 2/6 ± 87/14 و 1/21 ± 80/73 بود که پس از یخ‌گشایی به 1/26 ± 65/38 رسید (0/05 > P). تعداد و مساحت کلونیهای اسپرماتوگونی تشکیل شده در تیمار چهار (غلظت 200 میکرومول ال- آرژنین) با دیگر گروههای آزمایشی از نظر آماری تفاوت معناداری داشت (0/05 > P). همچنین سلولهای جدا شده نشانگرهای سطحی مربوط به سلولهای بنیادی را بیان کردند.
نتیجه‌گیری: احتمالاً افزودن غلظت 200 میکرومول بر لیتر ال- آرژنین به محیط کشت آثار مطلوبی بر القای کلونیزایی سلولهای منجمد- ذوبشده اسپرماتوگونی بز به صورت کشت کوتاه‌مدت و در شرایط آزمایشگاهی دارد.
روش کار: مطالعه حاضر تجربی است و پنج بار تکرار انجام شد. سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از روش هضم آنزیمی دو مرحلهای از بیضههای بزغالههای نابالغ استخراج و با حذف تمایزی تخلیص شد. پس از انجماد- یخ‌گشایی در یک دوره کشت 10 روزه در شش گروه آزمایشی شامل گروه شاهد (کشت سلولها در محیط پایه DMEM حاوی 1 درصد آنتی‌بیوتیک و 5 درصد سرم جنینی گاو) و تیمارهای 2، 3، 4، 5 و 6 به ترتیب شامل محیط پایه به اضافه غلظتهای 50، 100، 200، 500 و 1000 میکرومول بر لیتر ال- آرژنین، کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونیهای تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 بررسی شد. داده‌ها با آزمون آنالیز واریانس یک‌طرفه و آزمون تکمیلی توکی در سطح 5 درصد با نرم‌افزار آماریMinitab 16 آنالیز شدند. برای شناسایی سلولهای اسپرماتوگونی از آزمون RT- PCR نشانگرهای ID4، BCL6، PGP9.5، PLZF، VASA و OCT-4 استفاده شد.
یافته‌ها: درصد حیات سلولها پس از جداسازی و افزودن محلول انجماد به ترتیب 2/6 ± 87/14 و 1/21 ± 80/73 بود که پس از یخ‌گشایی به 1/26 ± 65/38 رسید (0/05 > P). تعداد و مساحت کلونیهای اسپرماتوگونی تشکیل شده در تیمار چهار (غلظت 200 میکرومول ال- آرژنین) با دیگر گروههای آزمایشی از نظر آماری تفاوت معناداری داشت (0/05 > P). همچنین سلولهای جدا شده نشانگرهای سطحی مربوط به سلولهای بنیادی را بیان کردند.
نتیجه‌گیری: احتمالاً افزودن غلظت 200 میکرومول بر لیتر ال- آرژنین به محیط کشت آثار مطلوبی بر القای کلونیزایی سلولهای منجمد- ذوبشده اسپرماتوگونی بز به صورت کشت کوتاه‌مدت و در شرایط آزمایشگاهی دارد.
واژه‌های کلیدی: سلول بنیادی اسپرماتوگونی، انجماد، کشت سلول، ال- آرژنین، بز
نوع مطالعه: پژوهشی |
موضوع مقاله:
علوم سلولی( سلولی مولکولی، سلول های بنیادی)
دریافت: 1403/3/5 | پذیرش: 1403/10/3 | انتشار: 1403/12/21
دریافت: 1403/3/5 | پذیرش: 1403/10/3 | انتشار: 1403/12/21
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
This Journal is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License | Research in Medicine
Designed & Developed by : Yektaweb