Ethics code: IR.RAZI.REC.1400.051
نجفی فاطمه، رحیمی فیلی پیمان، مقدم علی اصغر، محمدی طیبه. ارزیابی آثار غلظتهای مختلف ال _ آرژنین برالقایکلونیزایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی منجمد-ذوب شده بز در کشت کوتاهمدت. پژوهش در پزشکی. 1403; 48 (4)
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3380-fa.html
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران ، drp.rahimi@gmail.com
چکیده: (181 مشاهده)
سابقهوهدف: با توجه به اهمیت توسعه روشهای کشت و انجماد سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی به عنوان اساس مطالعههای ژنتیکی، طب بازساختی، طراحی حیوانات تراریخته و داروهای نوترکیب، تلاش برای ایجاد یک سیستم کشت مناسب اهمیت فراوانی دارد. هدف از انجام مطالعه حاضر، ارزیابی آثار غلظتهای مختلف اسیدآمینه
ال-آرژنین بر تکثیر اسپرماتوگونیهای منجمد-ذوب شده بز در شرایط آزمایشگاه است.
روش بررسی: مطالعه حاضر تجربی است و پنج بار تکرار انجام شد. سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از روش هضم آنزیمی دو مرحلهای از بیضههای بزغالههای نابالغ استخراج و با حذف تمایزی تخلیص شد. پس از انجماد-یخگشایی در یک دوره کشت 10 روزه در شش گروه آزمایشی شامل گروه شاهد(کشت سلولها در محیط پایه DMEM حاوی 1 درصد آنتیبیوتیک و 5 درصد سرم جنینی گاو) و تیمارهای 2، 3، 4، 5 و 6 به ترتیب شامل محیط پایه به اضافه غلظتهای 50، 100، 200، 500 و 1000 میکرومول بر لیتر ال-آرژنین، کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونیهای تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 بررسی شد. دادهها با آزمون آنالیز واریانس یکطرفه و آزمون تکمیلی توکی در سطح 5 درصد با نرمافزار آماری Minitab 16 آنالیز شدند. برای شناسایی سلولهای اسپرماتوگونی از آزمون RT_PCR نشانگرهای ID4، BCL6، PGP9.5، PLZF ، VASA و OCT-4 استفاده شد.
یافتهها: درصد حیات سلولها پس از جداسازی و افزودن محلول انجماد به ترتیب 2/6±87/14 و 1/21±80/72 بود که پس از یخگشایی به 1/26±65/38 رسید (P<0.05). تعداد و مساحت کلونی های اسپرماتوگونی تشکیل شده در تیمار چهار (غلظت 200 میکرومول ال-آرژنین) با دیگر گروه های آزمایشی از نظر آماری تفاوت معناداری داشت(P<0.05). همچنین سلولهای جدا شده نشانگرهای سطحی مربوط به سلولهای بنیادی را بیان کردند.
نتیجهگیری: احتمالاً افزودن غلظت 200 میکرومول بر لیتر ال-آرژنین به محیط کشت آثار مطلوبی بر القای کلونیزایی سلولهای منجمد-ذوب شده اسپرماتوگونی بز به صورت کشت کوتاهمدت و در شرایط آزمایشگاهی دارد.
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
علوم سلولی( سلولی مولکولی، سلول های بنیادی) دریافت: 1403/3/5 | پذیرش: 1403/10/3 | انتشار: 1403/12/21
ارسال پیام به نویسنده مسئول