Behdani M, Karimipour M, Khanahmad Shahreza H, Asadzadeh N, Azadmanesh K, Khabiri A, et al . Production of camel polyclonal antibody against vascular endothelial growth factor receptor-2 and performance evaluation in ELISA test. Research in Medicine 2011; 35 (2) :93-98
URL:
http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-887-fa.html
بهدانی مهدی، کریمی پور مرتضی، خان احمد حسین، اسدزاده نادر، آزادمنش کیهان، خبیری علیرضا، و همکاران.. تولید آنتیبادی پلیکلونال شتری علیه گیرنده 2 فاکتور رشد سلولهای آندوتلیال عروق و بررسی عملکرد آن. پژوهش در پزشکی. 1390; 35 (2) :93-98
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-887-fa.html
بخش پزشکی مولکولی، انستیتو پاستور ایران ، sirouszeinali@yahoo.com
چکیده: (13636 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف: بخشی از آنتیبادیهای شتر فاقد زنجیره سبک هستند و ناحیه اتصال به آنتیژن در این نوع از آنتیبادیها تنها دارای یک دومین میباشد. یکی از پروتئینهای درگیر در آنژیوژنز گیرنده 2 فاکتور رشد سلولهای آندوتلیال عروق (VEGFR-2) است که در تومورهای مختلف افزایش دارد و بررسی آن در سطح سلولها با آنتیبادی در تحقیقات انجام میگیرد.
روش بررسی: دو شتر نر توسط آنتیژن VEGFR-2 ایمن شدند. برای بررسی ایمن شدن شترها تست الایزا انجام گرفت. آنتیبادی-های شتری توسط ستونهای کروماتوگرافی پروتئین A و G تخلیص گردیدند. از آنتیبادیهای پلیکلونال جدا شده در تست الایزا بر پایه سلول (Cell-based ELISA) جهت بررسی میزان بیان پروتئین VEGFR-2 در سطح سلولهای 293/KDR، HUVECs و A431 مورد استفاده قرار گرفت.
یافتهها: در تست الایزا، سرم شترها تا رقت 12800/1 پاسخ دادند. آنتیبادیهای تک زنجیرهای توسط ستونهای افینیتی کروماتوگرافی جدا شدند و در SDS-PAGE تایید شدند. در تست الایزا بر پایه سلول (Cell-based ELISA)، سلول 293/KDR نسبت به سلول HUVECs جذب نوری بالاتری داشت و در مقابل سلول A431 جذب نوری کمتری را نشان داد که دلیل آن عدم حضور VEGFR-2 در سطح این سلول میباشد.
نتیجهگیری: آنتیبادی پلی کلونال تک زنجیرهای میتواند در طراحی کیت الایزا برای تشخیص شکل محلول این پروتئین، استفاده در فلوسیتومتری برای تشخیص سلولهای بیان کننده این گیرنده، انجام وسترن بلاتینگ و ایمنوهیستوشیمی بر روی بافتها استفاده شود.
واژگان کلیدی: شتر، آنتیبادی تک زنجیرهای، آنتیبادی پلیکلونال، گیرنده 2 فاکتور رشد سلولهای آندوتلیال عروق
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
بین رشته ای ( مدیریت آموزشی، تحقیقات آموزشی، آموزش پزشکی ) دریافت: 1390/7/5 | انتشار: 1390/3/25
ارسال پیام به نویسنده مسئول