3 گروه ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ، mosaffan@sbmu.ac.ir
چکیده: (16099 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف: تحت گروه لنفوسیتی CD5+ B-1 در مواقع لزوم قادر به تولید آنتیبادیهای طبیعی با خاصیت واکنشی متعدد بوده و اصلی ترین لیگاند آنها، لیپوپلیساکارید (LPS) است. از آنجایی که تولید آنتیبادیها در شرایط آزمایشگاهی و خارج از بدن موجود زنده میتواند کاربرد بسیاری در تکنولوژی تخلیص مواد داشته باشد، این تحقیق با هدف جداسازی، کشت و تعیین غلظت آنتیبادی در مایع رویی کشت این لنفوسیتها انجام شد.
روش بررسی: این تحقیق با طراحی اکتشافی انجام گردید. با خون گیری مستقیم از قلب، پرفیوژن طحال و خارجسازی سلولهای آن و لاواژ پریتونئال موشهای نژاد Balb/c سلول ها گرفته شدند و با کمک گرادیان فایکول و ستون نایلون وول، لنفوسیتهای B تخلیص گردیدند و در دو گروه مورد و شاهد در محیط کامل کشت سلولی توسط LPS تحریک شدند و در سه زمان 24،48 و 72 ساعت در انکوباسیون قرار گرفتند. مایع رویی کشت به منظور اندازهگیری غلظت IgM با تکنیک الایزا سنجیده و فعالیت حیاتی و قدرت تکثیر توسط آزمون MTT بررسی شد. بررسیهای ایمونوفنوتایپینگ برای تایید خلوص سلولها به کمک مارکر CD3 و CD5 صورت پذیرفت.
یافته ها: کشت 24 ساعته لنفوسیتها در دو ارگان طحال و پریتوئن، بالاترین فعالیت ترشحی IgM را داشتند که اختلاف معنیداری را با گروههای شاهد نشان دادند. در بررسی ایمونوفنوتایپینگ، لنفوسیتهای B تخلیص شده از پریتوئن در مقایسه با طحال و خون، درصد بالاتری از مارکر CD5 را نشان دادند.
نتیجه گیری: سلولهای پریتوئن و طحال منبع بسیار خوبی برای تهیه IgM با اختصاصیت متعدد در شرایط داخل لولهای آزمایشگاهی میباشند. تخلیص این سلولها و فراهم نمودن شرایط مناسب کشت سلولی میتواند راهگشای انجام مطالعات جامعتری باشد.
واژگان کلیدی: لنفوسیت B-1، محرک لیپوپلیساکارید، IgM با اختصاصیت متعدد، طحال، پریتوئن، موش Balb/c
نوع مطالعه:
پژوهشی |
موضوع مقاله:
ایمنیشناسی دریافت: 1388/12/4 | انتشار: 1388/10/25
ارسال پیام به نویسنده مسئول