جلد 48، شماره 2 - ( 6-1403 )
جلد 48 شماره 2 صفحات 36-27 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.IAU.KERMAN.REC.1401.078
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Sadeghi S, Khandan Dezfully N, Amini K. Molecular Study and Cloning of the dt Gene of Corynebacterium in Susceptible Cells in Order to Prepare a Vaccine. Research in Medicine 2024; 48 (2) :27-36
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3299-fa.html
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3299-fa.html
صادقی سمانه، خندان دزفولی نوشین، امینی کیومرث. مطالعه مولکولی و کلونینگ ژن dt کورینه باکتریوم در سلول مستعد برای تهیه واکسن. پژوهش در پزشکی. 1403; 48 (2) :27-36
گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران. ، nooshinkhandan22@gmail.com
چکیده: (377 مشاهده)
سابقه و هدف: کورینه باکتریوم دیفتریه باکتری هوازی، گرم مثبت و غیر اسپورزا است. توکسین دیفتری (dt)، پروتئینی با سمیت بسیار بالا بوده و در اثر آلودگی باکتری به کورینه فاژ خاصی که حامل tox است، تولید می‌شود. هدف از مطالعه حاضر، کلونینگ ژن dt کورینه باکتریوم در سلول مستعدE.coli XL1blue برای تولید پروتئین نوترکیب و استفاده از این پروتئین در تحقیق‌های بعدی در سال 1401 در مؤسسه پژوهشی پاسارگارد بود.
روش کار: در این مطالعه مقطعی، یک نمونه DNA سویه واکسینال کورینه باکتریوم دیفتریه 8PW تحت سویه 2000CN از موسسه رازی تهران تهیه شد. برای شناسایی ژن dt، DNA سویه باکتری با استفاده از پرایمرهای اختصاصی در روش واکنش زنجیره‌ای پلیمر از (PCR) تکثیر یافت. با استفاده از کیت TA-کلونینگ ژن مذکور در سلول مستعد E.coli XL1blue انجام شد. رسم درخت فیلوژنی با استفاده از تعیین توالی ناحیه ژنی srRNA 16 برای سویه باکتری استفاده شده با نرم‌‌افزارclustalX و Mega5 انجام شد.
یافته‌ها: DNA سویه کورینه باکتریوم دیفتری حامل ژن dt بودند. انجام TA-کلونینگ ژن dt با روش‌های Real Time PCR، تعیین توالی محصول PCR، حضور کلنی‌های سفید آبی و تکثیر با پرایمر M13 تأیید شد. نتیجه تعیین توالی ناحیه ژنی SrRNA 16 تأیید‌کننده کورینه باکتریوم دیفتری بود.
نتیجه‌گیری: در این بررسی ژن dt در وکتور E.coli XL1blue کلون و سپس تأیید شد و در جهت آمادهسازی برای ابزار پروتئین نوترکیب و همچنین به عنوان یک آنتی‌ژن قوی در تحریک سیستم ایمنی میتواند در نظر گرفته شود. این ژن میتواند در مطالعه‌های بعدی استفاده شود.
روش کار: در این مطالعه مقطعی، یک نمونه DNA سویه واکسینال کورینه باکتریوم دیفتریه 8PW تحت سویه 2000CN از موسسه رازی تهران تهیه شد. برای شناسایی ژن dt، DNA سویه باکتری با استفاده از پرایمرهای اختصاصی در روش واکنش زنجیره‌ای پلیمر از (PCR) تکثیر یافت. با استفاده از کیت TA-کلونینگ ژن مذکور در سلول مستعد E.coli XL1blue انجام شد. رسم درخت فیلوژنی با استفاده از تعیین توالی ناحیه ژنی srRNA 16 برای سویه باکتری استفاده شده با نرم‌‌افزارclustalX و Mega5 انجام شد.
یافته‌ها: DNA سویه کورینه باکتریوم دیفتری حامل ژن dt بودند. انجام TA-کلونینگ ژن dt با روش‌های Real Time PCR، تعیین توالی محصول PCR، حضور کلنی‌های سفید آبی و تکثیر با پرایمر M13 تأیید شد. نتیجه تعیین توالی ناحیه ژنی SrRNA 16 تأیید‌کننده کورینه باکتریوم دیفتری بود.
نتیجه‌گیری: در این بررسی ژن dt در وکتور E.coli XL1blue کلون و سپس تأیید شد و در جهت آمادهسازی برای ابزار پروتئین نوترکیب و همچنین به عنوان یک آنتی‌ژن قوی در تحریک سیستم ایمنی میتواند در نظر گرفته شود. این ژن میتواند در مطالعه‌های بعدی استفاده شود.
نوع مطالعه: پژوهشی |
موضوع مقاله:
میکروب‌شناسی
دریافت: 1402/4/9 | پذیرش: 1403/4/10 | انتشار: 1403/6/26
دریافت: 1402/4/9 | پذیرش: 1403/4/10 | انتشار: 1403/6/26
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
This Journal is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License | Research in Medicine
Designed & Developed by : Yektaweb