جلد 48، شماره 1 - ( 2-1403 )
جلد 48 شماره 1 صفحات 37-28 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.NIGEB.EC.1400.2.26.C
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Khani M, Javeri A, Bazargani A, Karimi G, Fakhr Taha M. Investigating the Effect of miR-302/367 Cluster Overexpression on the Expression of mTOR Signaling Pathway Genes in Human Adipose Tissue- Derived Stem Cells. Research in Medicine 2024; 48 (1) :28-37
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3319-fa.html
URL: http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/article-1-3319-fa.html
خانی مریم، جاوری آرش، بازرگانی آرزو، کریمی گیلدا، فخرطه معصومه. بررسی تأثیر بیشبیان کلاستر miR-302/367 بر بیان ژنهای مسیر پیامرسان mTOR در سلولهای بنیادی بافت چربی انسانی. پژوهش در پزشکی. 1403; 48 (1) :28-37
گروه سلولهای بنیادی و پزشکی بازساختی، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیستفناوری، تهران، ایران. ، mftaha@nigeb.ac.ir
چکیده: (525 مشاهده)
سابقه و هدف: کلاستر miR-302/367 نقش مهمی در بازبرنامهریزی سلولهای سوماتیک به سلولهای بنیادی پرتوان و حفظ پرتوانی ایفا میکند. تا به حال، مطالعههای متعددی در زمینه مکانیسم عمل کلاستر miR-302/367 در بازبرنامهریزی انجام شده، اما یافته چندانی درباره تأثیر اختصاصی این کلاستر بر مسیر پیامرسان mTOR وجود ندارد. مسیر mTOR علاوه بر کنترل روندهای سلولی مختلف، نظیر تکثیر، تمایز و اتوفاژی، نقش مهمی را در فرآیند بازبرنامهریزی برعهده دارد. بر این اساس، مطالعه حاضر با هدف شناسایی تأثیر کلاستر miR-302/367 روی مسیر mTOR در سلولهای بنیادی بافت چربی طراحی شد.
روش کار: در این مطالعه تجربی، سلولهای بنیادی بافت چربی در مرحله پاساژ سوم تا پنجم با استفاده از کیت و سیستم ترنسفکشن نئون با وکتور TDH101PA-GP بیانکننده کلاستر mir-302/367 و وکتور Mock ترنسفکت شدند. یک هفته پس از ترنسفکشن، بیان برخی از ژنهای مسیر پیامرسان mTOR در سلولهای بنیادی بافت چربی با روش Real-Time PCR مقایسهای بررسی شد. نسبت بیان ژنها در گروههای miR-302/367 و Mock (4 تکرار) با استفاده از نرمافزار REST 2009 و آزمون Pair Wise Fixed Reallocation Randomization Test بین دو گروه مقایسه شد. همچنین، بیان برخی از پروتئینهای مسیر mTOR با روش وسترن بلات ارزیابی شد.
یافتهها: بیشبیان کلاستر miR-302/367 سبب کاهش معنادار در بیان ژنهای AKT، MTOR، RAPTOR و RICTOR شد، به طوری که بیان این ژنها در گروه miR-302/367 نسبت به گروه Mock به ترتیب به 0/44، 0/51، 0/56 و 0/6 کاهش یافت (P<0.05). بیان ژنها در گروه Mock یک در نظر گرفته شد. همچنین، طبق بررسی وسترن بلات بیان پروتئینهای AKT فسفریله و MTOR فسفریله در سلولهای بنیادی بافت چربی ترنسفکت شده با کلاستر miR-302/367 کمتر از گروه Mock بود.
نتیجهگیری: به نظر میرسد که بیش بیان خوشه miR-302/367 میتواند فعالیت مسیر پیامرسان mTOR را در سلولهای بنیادی بافت چربی مهار کند و با این مکانیسم بازبرنامهریزی سلولها را تحت تأثیر قرار دهد.
روش کار: در این مطالعه تجربی، سلولهای بنیادی بافت چربی در مرحله پاساژ سوم تا پنجم با استفاده از کیت و سیستم ترنسفکشن نئون با وکتور TDH101PA-GP بیانکننده کلاستر mir-302/367 و وکتور Mock ترنسفکت شدند. یک هفته پس از ترنسفکشن، بیان برخی از ژنهای مسیر پیامرسان mTOR در سلولهای بنیادی بافت چربی با روش Real-Time PCR مقایسهای بررسی شد. نسبت بیان ژنها در گروههای miR-302/367 و Mock (4 تکرار) با استفاده از نرمافزار REST 2009 و آزمون Pair Wise Fixed Reallocation Randomization Test بین دو گروه مقایسه شد. همچنین، بیان برخی از پروتئینهای مسیر mTOR با روش وسترن بلات ارزیابی شد.
یافتهها: بیشبیان کلاستر miR-302/367 سبب کاهش معنادار در بیان ژنهای AKT، MTOR، RAPTOR و RICTOR شد، به طوری که بیان این ژنها در گروه miR-302/367 نسبت به گروه Mock به ترتیب به 0/44، 0/51، 0/56 و 0/6 کاهش یافت (P<0.05). بیان ژنها در گروه Mock یک در نظر گرفته شد. همچنین، طبق بررسی وسترن بلات بیان پروتئینهای AKT فسفریله و MTOR فسفریله در سلولهای بنیادی بافت چربی ترنسفکت شده با کلاستر miR-302/367 کمتر از گروه Mock بود.
نتیجهگیری: به نظر میرسد که بیش بیان خوشه miR-302/367 میتواند فعالیت مسیر پیامرسان mTOR را در سلولهای بنیادی بافت چربی مهار کند و با این مکانیسم بازبرنامهریزی سلولها را تحت تأثیر قرار دهد.
واژههای کلیدی: کلاستر miR-302/367، ترنسفکشن، مسیر mTOR، سلولهای بنیادی بافت چربی، ژن AKT، ژن MTOR، ژن RAPTOR، ژن RICTOR، AKT فسفریله، MTOR فسفریله
نوع مطالعه: پژوهشی |
موضوع مقاله:
علوم سلولی( سلولی مولکولی، سلول های بنیادی)
دریافت: 1402/6/1 | پذیرش: 1402/9/19 | انتشار: 1403/2/3
دریافت: 1402/6/1 | پذیرش: 1402/9/19 | انتشار: 1403/2/3
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
This Journal is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License | Research in Medicine
Designed & Developed by : Yektaweb